[发明专利]一种制备玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法在审
| 申请号： | 201810162591.0 | 申请日： | 2018-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN108342432A | 公开（公告）日： | 2018-07-31 |
| 发明（设计）人： | 韩铮;赵志辉;张志岐;范楷;聂冬霞;郭文博;杨俊花 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12P19/62 | 分类号： | C12P19/62;C12P19/18;C12N15/70;C12N9/10 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 张竹梅 |
| 地址： | 201403 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 玉米赤霉烯酮 葡萄糖苷 催化酶 底物 甲醇 体外 乙腈 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
以ZEN和UDP作为底物，HvUGT14077为催化酶，20-40℃反应5～10分钟，甲醇或者乙腈终止反应，制备得到ZEN-G。
2.根据权利要求1所述的制备玉米赤霉烯酮-葡萄糖苷的方法，其特征在于其中HvUGT14077的制备方法如下：
重组表达载体的构建：全基因合成大麦二磷酸尿苷葡萄糖-糖基转移酶HvUGT14077基因，克隆入pET22b-MBP，构建重组表达载体；
重组酶的表达纯化：载体转入大肠杆菌BL21，接种于LB培养基，25-40℃培养至OD600为0.6-0.8，加入诱导剂IPTG至终浓度0.1～1mmol/L，10-30℃诱导表达10-30小时，利用Ni-NTA Resin亲和层析柱纯化得到。
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