[发明专利]与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04及其应用有效
申请号: | 201810162728.2 | 申请日: | 2018-02-27 |
公开(公告)号: | CN108165654B | 公开(公告)日: | 2021-03-16 |
发明(设计)人: | 秦瑞云;邓传良;李晓月;李书粉;高武军 | 申请(专利权)人: | 河南师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6879;C12N15/11 |
代理公司: | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 | 代理人: | 路宽 |
地址: | 453007 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 菠菜 雄性 紧密 连锁 ssr 标记 sp_ssr04 及其 应用 | ||
1.与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04,其特征在于:该SSR标记SP_SSR04通过以下特异引物对扩增获得,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,该SSR标记的特异引物对可在菠菜雄株中扩增出176bp的特异条带,在菠菜雌株中无扩增产物,所述特异引物对为:
上游引物:5’-TTGATTGCCTCAAGGTGTTG-3’;
下游引物:5’-TGGGTTCTTAGCCACTTTTTG-3’。
2.权利要求1所述的与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04在菠菜性别鉴定中的应用,其特征在于具体过程为:首先提取待测菠菜的基因组DNA,以待测菠菜的基因组DNA为模板利用权利要求1中所示的特异引物对进行PCR扩增,PCR扩增反应体系为:10×PCR Buffer2μL、2.5mM dNTP Mixture 1μL、10μM/μL上游引物1.25μL、10μM/μL下游引物1.25μL、5U/μLTaq酶0.2μL、100-200ng模板DNA 1μL和无菌水13.3μL,PCR扩增反应程序为:95℃预变性2min;94℃变性1min,55℃退火1min,72℃延伸2min,共30个循环;最后72℃延伸7min;琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,若扩增出176bp的特异性条带则为雄性,若无扩增产物则为雌性。
3.根据权利要求2所述的与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04在菠菜性别鉴定中的应用,其特征在于:所述待测菠菜为菠菜栽培种或菠菜野生种。
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