[发明专利]一种番木瓜组培苗分化芽的茎段悬空植叶促根方法有效
申请号: | 201810163230.8 | 申请日: | 2018-02-26 |
公开(公告)号: | CN108112479B | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 杨护;魏岳荣;杨敏;黄炳雄;徐少峰 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院果树研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京智桥联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11560 | 代理人: | 侯桂丽 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分化芽 番木瓜组培苗 悬空 茎段 倒插 分化芽生根 假植成活率 生根培养基 基部切口 生根培养 根系 膨化 愈伤 叶片 生根 | ||
1.一种番木瓜组培苗分化芽的茎段悬空植叶促根方法,将番木瓜组培苗分化芽叶片倒插于生根培养基,从而使分化芽基部切口悬空进行生根培养,所述植叶促根方法包括如下步骤:
(1)选取较为老熟的具有3片叶以上的分化芽,将倒数第二或者第三片叶片的部分叶尖端倒插进生根培养基;其中,生根培养基为1/2MS+IBA2mg/L+活性炭2g/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,pH为5.8;
(2)第一周光照强度为2000-5000lx,第二周及以后光照强度为5000-10000lx进行生根培养。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中选取的分化芽具有3-5片叶;将叶尖端1/2-2/3插进生根培养基。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述分化芽通过包括如下步骤的方法制得:
(a)外植体选择和采集:根据结果性状和株性表现,挑选大田成龄优良单株侧芽,去掉叶片和叶柄后截取顶端作为外植体;
(b)外植体杀菌和消毒:先用酒精溶液浸泡,无菌水冲洗;再用升汞溶液浸泡,无菌水冲洗;
(c)初代培养:经消毒的外植体初始接种于初代培养基在光照强度为1500lx下培养25-28天;
(d)不定芽增殖培养:截取经初代培养后的外植体萌发的不定芽接种于增殖培养基在光照强度为2000lx下以21-28天为一个继代周期培养5个继代周期以上。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(a)中截取顶端2-5cm作为外植体。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(b)中酒精溶液浓度为75%,浸泡30秒;升汞溶液浓度为0.1%,浸泡6~8分钟;升汞溶液中加入1滴吐温-80;第一次无菌水冲洗2-3次,第二次无菌水冲洗4-5次。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(c)中初代培养基为MS+6-BA 0.1mg/L+KT0.2 mg/L+IAA0.4 mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8;光照培养在28℃条件下,每日光照培养12小时。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(d)中增殖培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+KT0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8;光照培养在28℃条件下,每日光照培养12小时;培养8-10个继代周期后可产生大量丛生不定芽。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中每日光照培养12-14小时;生根培养在28-32℃下进行。
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