[发明专利]一种SD大鼠临床检验方法

说明书

本发明提供了一种新的SD大鼠临床检验方法，对进行长期毒性试验的SD大鼠进行临床检验，该检验方法稳定有效，通过观察供试品对实验动物产生的毒性反应及其严重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆程度，可有效的提供无毒性反应剂量，为临床设计人用剂量和主要观察指标提供参考。

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及一种SD大鼠临床检验方法。

背景技术

毒性试验为给实验动物进行不同途径、不同期限的染毒、检测各种毒性终点的实验，其目的是确定无害作用水平、毒性类型、靶器官、剂量-反应关系，为安全性评价或危险性评价提供重要的资料。

长期毒性试验为在急性毒性试验结果的基础上，观察评价动物反复给予受试物后，机体产生毒性反应的特征及其毒性损害的严重程度，以及主要毒性靶器官及其损害的可逆性。

受试物长期毒性试验的目的是提供受试物的无毒性反应剂量和临床主要检测指标，为制定人用安全剂量提供参考资料。一种好的长期毒性试验方法，可推动毒性试验方法的统一和规范化，获得符合管理部门所需毒性资料。

发明内容

为此，发明人提供一种适合长期毒性研究的SD大鼠临床检验方法。为实现上述目的，发明人提供了一种SD大鼠临床检验方法，包括以下步骤：

SD大鼠给药试验结束后，SD大鼠禁食12～16小时后灌胃2％的戊巴比妥钠生理盐水溶液进行麻醉，从心脏采血完毕后处死后进行解剖；检测血液、血清的生化指标并对解剖后的器官或组织进行称重和病理组织学检查。

进一步地，所述血液生化指标包括红细胞计数、血红蛋白定量、红细胞比积、血小板计数、白细胞计数、中性粒细胞定量、淋巴细胞定量、单核细胞定量、嗜酸性粒细胞定量、网织红细胞计数。

进一步地，所述血清生化指标包括丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、尿素、肌酐、总蛋白、白蛋白、葡萄糖、总胆固醇、甘油三脂。

进一步地，所述SD大鼠进行称量重量的组织器官包括：心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、脑、肾上腺、睾丸、卵巢。

进一步地，所述SD大鼠进行病理组织学检查的组织器官包括：脑、心脏、肺、肝脏、肾脏、脾脏、胃、小肠、大肠、睾丸、卵巢、肾上腺。

进一步地，所述病理组织学检查包括以下步骤：将组织器官进行固定，固定后的组织经修块取材，逐级酒精脱水石蜡包埋轮转式切片，经苏木素-伊红染色，光镜下进行检查。

进一步地，所述HE染色步骤包括：将病理切片置于65℃烘箱中5min,将切片置于二甲苯中两次进行脱蜡，酒精梯度脱去二甲苯。苏木素染色6min,清水冲洗2min后，梯度乙醇依次脱水，伊红染色2min,无水乙醇浸泡3min后再置于二甲苯中浸泡3min,中性树胶封片。

进一步地，进行临床检验的SD大鼠毒性培育方式包括：给药方式为连续灌胃，其中健康SD大鼠按体重随机分为4组：溶媒对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组数量相同，雌雄各半；

低、中、高剂量组给药剂量分别为500、1500、4500mg/kg大鼠，溶媒对照组灌胃0.2％CMC-Na，给药容量均为10ml/kg大鼠；

所述溶媒由CMC-Na用去离子水配置，为质量百分比为0.2％的CMC-Na溶液；

所述低剂量组、中剂量组、高剂量组，为溶媒溶解待检测药剂，配置浓度分别为50mg/ml、150mg/ml、450mg/ml。

区别于现有技术，上述技术方案提供了一种新的SD大鼠临床检验方法，对进行长期毒性试验的SD大鼠进行临床检验，该检验方法稳定有效，通过观察供试品对实验动物产生的毒性反应及其严重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆程度，可有效的提供无毒性反应剂量，为临床设计人用剂量和主要观察指标提供参考。