[发明专利]一种根皮素的制备方法

说明书

本发明涉及一种根皮素的制备方法，属于植物提取技术领域，该方法具体为：(1)将根皮苷含量丰富的植物材料进行水煮，获取水煮液；(2)将绿色木霉孢子悬液接种于步骤(1)中的获得的水煮液中进行发酵，待发酵结束后，对发酵液进行过滤除去菌体，获得滤液，先对所述滤液进行冷藏，再从经冷藏后的滤液中获取沉淀，然后将所述沉淀纯化后制得根皮素固体。该方法操作简便且不需要大量的有机溶剂，具有成本低、绿色环保等优势，且最终制备的根皮素不但产量高且纯度高，适合根皮素的大规模生产。

技术领域

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种根皮素的制备方法。

背景技术

根皮素是一种二氢查耳酮化合物，具有抗氧化、抗炎、降血糖、祛斑及光滑肤质等作用，主要分布于苹果等的果皮及根皮中，其已被用于美容护肤产品中。目前，常见的根皮素制备方法有直接提取分离、化学合成及利用根皮苷进行化学及生物半制备等方法。其中，直接提取分离法虽然路线简单，但提取材料本身根皮素含量低，且分离过程中耗费大量的填料及化学溶剂；化学合成法产率不高于30％，且化学合成需要大量原料并存在副产物(IOD：10.1002/chin.200618063)。申请号为201310238175.1的中国发明专利公开了利用化学半合成法制备根皮素，其中需要购买根皮苷原料且需要酸碱及复杂的反应条件。《具有生物活性的天然产物根皮素的合成与纯化的相关研究》等通过柚皮苷半合成根皮素法需要大量柚皮苷等原料且需通过多步化学反应才能得到。申请号为200910228671.2的中国发明专利采用酶法发酵制备根皮素，但酶的本身成本高且不稳定，长期使用后酶活性会显著降低。《紫变青霉生物转化根皮苷制备根皮素的研究》利用微生物转化发酵根皮苷得到根皮素，此方法需要额外配置产酶培养基且需要购买根皮苷原料。上述方法不但成本高，且制备工艺复杂，因此，急需一种简单经济的根皮素制备方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种根皮素的制备方法

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种根皮素的制备方法，所述方法包括如下步骤：

(1)将根皮苷含量丰富的植物材料进行水煮，获取水煮液；

(2)将绿色木霉孢子悬液接种于步骤(1)中的获得的水煮液中进行发酵，待发酵结束后，对发酵液进行过滤除去菌体，获得滤液，先对所述滤液进行冷藏，再从经冷藏后的滤液中获取沉淀，然后将所述沉淀纯化后制得根皮素固体。

优选的，所述方法包括如下步骤：

(1)将根皮苷含量丰富的植物材料放入水中水煮10-20min，获得根皮苷浓度为4-10mg/mL的水煮液；

(2)按0.5-2％的接种量将孢子浓度为3-7×10⁷CFU/mL的绿色木霉孢子悬液接种于步骤(1)中的获得的水煮液中，然后在28℃下发酵，待所述发酵结束后，对发酵液进行过滤去除菌体，获得滤液，然后先对所述滤液进行冷藏，再从经冷藏后的滤液中获取沉淀，然后将所述沉淀纯化后制得根皮素固体。

优选的，所述方法包括如下步骤：

(1)将根皮苷含量丰富的植物材料放入水中水煮15min，获得根皮苷浓度为6mg/mL的水煮液；

(2)按1％的接种量将孢子浓度为6×10⁷CFU/mL的绿色木霉孢子悬液接种于步骤(1)中的获得的水煮液中，然后在28℃下发酵，待所述发酵结束后，对发酵液进行过滤去除菌体，获得滤液，然后先对所述滤液进行冷藏，再从经冷藏后的滤液中获取沉淀，然后将所述沉淀纯化后制得根皮素固体。

优选的，步骤(2)中，所述过滤为采用孔径为0.5-2mm的纱布进行过滤。

优选的，步骤(2)中，所述冷藏为在4℃下冷藏。

优选的，步骤(2)中，所述获取沉淀的方法为抽滤或低温离心后过滤。