[发明专利]一种分泌抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞

说明书

本申请属于生物技术领域，涉及但不限于一种分泌抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。本申请利用蓝舌病血清1型病毒作为免疫原，得到能够分泌对蓝舌病病毒具有群特异性的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及由其分泌的单克隆抗体。本申请产生的单克隆抗体能够取代兔源蓝舌病病毒抗体与蓝舌病病毒NS3蛋白结合。

技术领域

本申请属于生物技术领域，具体地涉及一种分泌抗蓝舌病病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞及由其分泌的单克隆抗体。

背景技术

蓝舌病是由蓝舌病病毒感染引起的、由昆虫(主要是库蠓)传播的反刍动物病毒性传染病。蓝舌病病毒属于呼肠孤病毒科，环状病毒属蓝舌病病毒亚群。

蓝舌病最早于1876年在南非被发现，因其感染动物后，动物的口腔粘膜及舌头会变蓝，故而在1906年被命名为“蓝舌病”。在1940年以前，蓝舌病仅仅在非洲传播。然而，在1948年，美国也报道了此病。我国于 1979年在云南省师宗县首次发现蓝舌病，并分离得到蓝舌病病毒。

抗蓝舌病病毒的单克隆抗体是蓝舌病诊断中非常好用的工具。然而，蓝舌病病毒有24个血清型(最近几年国外又陆续发现3个新的血清型，但对这3个新血清型的具体研究才刚刚起步)，而常用的单克隆抗体只对一种或至多几种蓝舌病病毒血清型敏感，因此很难满足蓝舌病的群特异性诊断方面的研究需要。已经报道的具有群特异性的蓝舌病病毒单克隆抗体并不是通过用天然病毒免疫获得的，而是通过用人工表达的蛋白免疫后制备的。这种单克隆抗体和通过用天然病毒免疫制备获得的单克隆抗体是不能完全等同的。

因此，本领域需要对蓝舌病病毒具有群特异性、通过用天然病毒免疫制备获得的单克隆抗体。

发明内容

本申请的一个目的是得到能够分泌对蓝舌病病毒具有群特异性且对其NS3蛋白敏感的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

蓝舌病病毒(BTV)的NS3蛋白由蓝舌病病毒的S10基因编码，并且是高度保守的。NS3蛋白包括NS3蛋白和NS3A蛋白，同一血清型的这两种蛋白的氨基酸排列顺序相同，只是后者少了13个氨基酸。如果能够获得对NS3蛋白敏感的单克隆抗体，那么该单克隆抗体在绝大多数情况下对这两个蛋白都敏感，并且很可能具有群特异性。

本申请提供了能够分泌抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，以及由该杂交瘤细胞分泌的抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体。

特别地，本申请在第一方面提供了一种杂交瘤细胞，所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体对蓝舌病病毒具有群特异性。在本申请中，所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体对蓝舌病1-24血清型病毒具有群特异性。在本申请中，所述杂交瘤细胞通过利用蓝舌病血清1型病毒作为免疫原制备获得。在本申请中，所述杂交瘤细胞的保藏编号为CCTCC：C2014202。

本申请在第二方面提供了一种单克隆抗体，其包含由本申请的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

本申请在第三方面提供了由本申请的杂交瘤细胞分泌的抗蓝舌病病毒NS3蛋白单克隆抗体。在本申请中，所述单克隆抗体能够取代兔源蓝舌病病毒抗体与蓝舌病病毒NS3蛋白结合。

本申请在第四方面提供了本申请的单克隆抗体在制备用于蓝舌病诊断的试剂盒中的用途。

与现有技术相比，由本申请的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体来源于用天然蓝舌病病毒颗粒的免疫并且对蓝舌病病毒具有优异的群特异性。由于没有证据显示人工表达的病毒蛋白的构象与天然病毒蛋白的构象完全相同，因此，用人工表达的病毒蛋白免疫产生的抗体与用天然病毒蛋白免疫产生的抗体当然也不会相同。由于本申请的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体是利用蓝舌病天然病毒颗粒获得的，所以其与蓝舌病病毒的结合更接近天然状态。

本申请的其它特征和优点将在随后的描述中阐述，并且，部分地从这些描述中变得明显，或者通过实施本申请而被了解。本申请的其它目的和特点可通过在说明书、权利要求书以及附图中所特别指出的结构来实现与获得。