[发明专利]菌株、其构建方法及应用

权利要求书

1.野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris），其特征在于，在野油菜黄单胞菌中敲除pigA基因、添加vgb基因，并含有核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示的核苷酸分子。

2.野油菜黄单胞菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：扩增获得pigA上下游同源臂基因，从pBBR-vgb质粒上扩增获得vgb基因，通过overlap PCR将pigA基因的上下游同源臂及vgb基因连接，获得重组片段；所述重组片段为pigA上游同源臂-vgb基因-pigA下游同源臂；向pLO3质粒的多克隆位点处插入重组片段，构建获得pigA基因敲除及添加vgb基因的重组质粒pLO3-vgb；

所述vgb基因和所述pigA基因如权利要求1所示；

步骤2：将所述重组质粒pLO3-vgb转化至E. coliS17菌株，获得正确的转化子，得到重组菌株E. coliS17/pLO3-vgb；

步骤3：将所述重组菌株E. coliS17/pLO3-vgb接合转移至野生型野油菜黄单胞菌，Cm^r、tet^r双抗平板筛选单交换菌株，蔗糖致死筛选获得双交换重组子—pigA基因敲除及添加vgb基因的△pigA/vgb菌株。

3.根据权利要求2所述的构建方法获得的野油菜黄单胞菌。

4.根据权利要求1或3所述的野油菜黄单胞菌，其特征在于，其拉丁名为Xanthomonas campestris，保藏编号为CGMCC No.14771。

5.根据权利要求1、3或4所述的野油菜黄单胞菌在生产白色黄原胶中的应用。

6.一种生产白色黄原胶的方法，其特征在于，将如权利要求1、3或4所述的野油菜黄单胞菌接种于培养基中发酵培养，收集发酵液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：挑取如权利要求1、3或4所述的野油菜黄单胞菌单菌落接种到种子培养基，于200rpm、30℃培养20h，获得一级种子培养液；

步骤2：将所述一级种子培养液以1%体积百分比的接种量接种到种子培养基中，于200rpm、30℃培养20h，获得二级种子培养液；

步骤3：将所述二级种子培养液以以10%体积百分比的接种量接种到种子培养基中，于230rpm、28℃培养72h，收集发酵液。