[发明专利]一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白及其应用，将大量2型糖尿病患者和白血病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6的突变蛋白，根据该人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为2型糖尿病和白血病的基因诊断提供指引作用，实现2型糖尿病和白血病的诊断和治疗。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白及其应用。

背景技术

酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6是一个淋巴特异性的细胞内磷酸酶，属于酪氨酸磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphatase，PTP)家族，专一水解芳香族磷酸，通过对胰岛素受体或其底物上的酪氨酸残基去磷酸化作用，对胰岛素信号转导进行负调节，组织细胞中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B)过表达都会降低蛋白酪氨酸的活性，使胰岛素受体无法与胰岛素结合，进而引起胰岛素抵抗，最终导致2型糖尿病。

经研究发现，酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6的突变与白血病的发生有着重要作用，因此，对人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变的检测对判断人体是否患有病症，尤其是2型糖尿病和白血病具有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一种人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6的突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据所述人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白的核苷酸序列，与人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。

第四方面，提供一种特异性识别人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白的单克隆抗体，其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。

第五方面，提供一种用于检测人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。

优选地，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。

第六方面，提供一种基于上述任一所述ELISA试剂盒检测人的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6突变蛋白的抗体的方法，包括：

a、使用所述包被缓冲液对上述单克隆抗体进行稀释，并将稀释后的所述单克隆抗体加样至ELISA酶标板的孔中，并室温孵育；

b、使用所述样品稀释液将检测对象的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6蛋白稀释成不同浓度梯度，并将不同浓度梯度的酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型6蛋白分别加样至ELISA酶标板的孔中，室温孵育；

c、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；

d、加入所述酶标二抗，并室温孵育；

e、甩去各孔中的液体，加入所述ELISA酶标板洗涤液，洗涤并甩干；

f、加入所述显色液，室温避光孵育，并加入所述终止液终止反应；