[发明专利]一种用于酶联免疫试剂盒的组合物以及糖尿病抗体谱检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及酶联免疫技术领域，公开了一种用于酶联免疫试剂盒的组合物以及糖尿病抗体谱检测试剂盒及其制备方法。本发明所述组合物包括封闭液和酶标稀释液；所述封闭液含有BSA、聚乙烯醇、甘露醇、叠氮钠和磷酸氢二钠，所述酶标稀释液含有Tris、柠檬酸、BSA、聚乙二醇、阿拉伯树胶、甜菜碱和Proclin300。本发明从酶联免疫试剂盒的封闭液和酶标稀释液入手，通过选择适宜成分，使得酶联免疫试剂盒能够较长时间保持检测的稳定性。同时，以所述组合物制备的糖尿病检测试剂盒在具有较佳稳定性的基础上，还能够对糖尿病进行准确诊断和分型，特别是针对IAA的检测上，具备较高的阳性率。

技术领域

本发明涉及酶联免疫技术领域，具体涉及一种用于酶联免疫试剂盒的组合物以及糖尿病抗体谱检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状。糖尿病在病因，发病机制和自然病程等方面显示高度异质性，所以糖尿病是一组高血糖疾病的总称。糖尿病基于病因和发病机理分为Ⅰ型糖尿病、Ⅱ型糖尿病及其它类型。Ⅰ型糖尿病是以胰岛β细胞自身免疫破坏为重要病因的一种疾病，患者体内存在一种或多种针对胰岛β细胞胰岛素合成、转运和分泌的关键酶的自身抗体，主要包括胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素自身抗体(IAA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、酪氨酸磷酸抗体(IA-2A)、羧基肽酶抗体(CPH-A)和锌转运蛋白8抗体(ZnT8-A)等6种自身抗体。85％～90％患者在首次检出空腹高血糖时，通常存在一种或多种上述抗体。

蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术，是近年来发展起来的一项生物检测技术，这项技术是将蛋白质的分析微缩到小型芯片上，利用荧光或酶显色进行探测，最后用特定的计算机软件加以分析。依靠ELISA技术，蛋白质芯片能够快速、高通量、定量分析大量的蛋白样品，以及所需试剂和样品较少，产品化后价格更低廉等优势，使其迅速成为研究热点。但是，目前该类试剂盒的稳定性并不好。此外，该类试剂盒在检测糖尿病胰岛素自身抗体(IAA)的阳性率上存在不足，阳性率较低，容易漏检。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于酶联免疫试剂盒的组合物，使得所述组合物用于制备酶联免疫试剂盒时能够显著提高试剂盒在低温和室温下的稳定性，保存时间延长；

本发明的另外一个目的在于提供上述组合物在制备酶联免疫试剂盒中的应用，特别是用于检测糖尿病的相关试剂盒；

本发明的另外一个目的在于提供一种包含上述组合物的糖尿病抗体谱检测试剂盒及其制备方法，使得所述试剂盒在低温和室温下具有较长时间的稳定性，同时检测结果具有较高的特异性和敏感性；

本发明的另外一个目的在于提供一种包含上述组合物的糖尿病抗体谱检测试剂盒及其制备方法，使得所述试剂盒能够显著提高检测糖尿病胰岛素自身抗体(IAA)的阳性率。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种用于酶联免疫试剂盒的组合物，包括封闭液和酶标稀释液；所述封闭液含有BSA、聚乙烯醇、甘露醇、叠氮钠和磷酸氢二钠，所述酶标稀释液含有Tris、柠檬酸、BSA、聚乙二醇、阿拉伯树胶、甜菜碱和Proclin300。

针对现有酶联免疫试剂盒稳定较差、保存时间较短的缺陷，本发明意外发现了从制备试剂盒的封闭液和酶标稀释液(用于稀释酶标抗原或抗体用)入手，通过选择合适的组分完善两者的组成，能够显著提高酶联免疫试剂盒的稳定性和保存时间。