[发明专利]一种基于二代测序的个体识别体系、试剂盒及其用途

权利要求书

1.一种基于二代测序的个体识别体系，其特征在于，包括针对112个STR位点和318个SNP位点同时扩增设计的引物序列，所述112个STR位点包括53个常染色体STR位点、23个X染色体STR位点及35个Y染色体STR位点和一个性别决定位点AMEL；所述318个SNP位点包括186个常染色体SNP位点、69个X染色体SNP位点、57个Y染色体SNP位点、及6个血型表型相关SNP位点；

所述53个常染色体STR位点对应的引物序列如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.106所示；

所述性别决定位点AMEL和23个X染色体STR位点、35个Y染色体STR位点对应的引物序列如SEQ ID NO.107至SEQ ID NO.224所示；

所述186个常染色体SNP位点对应的引物序列如SEQ ID NO.225至SEQ ID NO.596所示；

所述69个X染色体SNP位点对应的引物序列如SEQ ID NO.597至SEQ ID NO.734所示；

所述57个Y染色体SNP位点对应的引物序列如SEQ ID NO.735至SEQ ID NO.848所示；

所述6个血型表型相关SNP位点对应的引物序列如SEQ ID NO.849至SEQ ID NO.860所示。

2.一种DNA分型检测的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的个体识别体系分型检测DNA。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述112个STR位点和318个SNP位点在同一个PCR扩增反应体系中同时扩增或者分开扩增。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应体系包括15ul的DNA聚合酶、5ul的引物混合物、1ul的DNA模板和4ul的去离子水。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应体系的温度循环包括四次循环，其中第一循环为在温度为95℃时间为5min条件下的1个循环；第二循环包括三个阶段的30个循环，所述三个阶段包括在温度为94℃时间为30s条件下的第一阶段、在温度为56℃时间为90s条件下的第二阶段、以及在温度为72℃时间为30s条件下的第三阶段；第三循环为在温度为72℃时间为10min条件下的1个循环；第四循环为在温度为4℃时间不限条件下的1个循环。

6.一种试剂盒，其特征在于，包括引物混合物，所述引物混合物包括权利要求1所述的引物序列。

7.如权利要求6所述的试剂盒，还包括缓冲液、DNA聚合酶、DNA模板和去离子水；

所述DNA模板来源包括血液、血斑、血浆、毛囊和口腔拭子。

8.如权利要求7所述的试剂盒在个体身份识别、亲缘关系鉴定、母血分型、混合复杂样本分型、二代DNA档案建立、血型鉴定及芯片生产中的应用。