[发明专利]一种多功能海藻多糖裂解酶基因及其应用在审

专利信息
申请号: 201810194929.0 申请日: 2018-03-09
公开(公告)号: CN108410849A 公开(公告)日: 2018-08-17
发明(设计)人: 肖安风;曾洁;杨秋明;倪辉;姜泽东;陈艳红;伍菱 申请(专利权)人: 集美大学
主分类号: C12N9/88 分类号: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/02;C12P19/12;C12R1/19
代理公司: 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 代理人: 赖庆梧
地址: 361000 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 海藻多糖裂解酶 基因工程菌 重组载体 卡拉胶 宿主 氨基酸序列 基因组DNA 表达宿主 海洋细菌 海藻酸钠 基因克隆 基因序列 饲料添加 引物扩增 高活性 核苷酸 海藻 基因 构建 琼脂 质粒 转化 克隆 应用
【权利要求书】:

1.一种多功能海藻多糖裂解酶基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种多功能海藻多糖裂解酶,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种包含如权利要求2所述多功能海藻多糖裂解酶的基因工程菌,其特征在于:该菌株中导入了多功能海藻多糖裂解酶基因。

4.一种如权利要求3所述基因工程菌的构建方法,其特征在于:包括如下步骤:

步骤一、以海洋细菌(Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5)基因组DNA为模板,通过设计特异性引物扩增多功能海藻多糖裂解酶Alg823基因全长序列;

步骤二、将所述多功能海藻多糖裂解酶基因克隆到质粒中,得到重组载体;

步骤三、将所述重组载体转化克隆宿主;

步骤四、将所述重组载体转化表达宿主,得到产多功能海藻多糖裂解酶的基因工程菌。

5.如权利要求4所述一种基因工程菌的构建方法,其特征在于:所述步骤一中,所述特异性引物为:

正向引物Alg823-F的序列如SEQ ID NO.3所示;

反向引物Alg823-R的序列如SEQ ID NO.4所示。

6.如权利要求4所述一种基因工程菌的构建方法,其特征在于:所述步骤二中,所述质粒为pET-28a(+)。

7.如权利要求4所述一种基因工程菌的构建方法,其特征在于:所述步骤三中,所述克隆宿主为大肠杆菌DH5α。

8.如权利要求4所述一种基因工程菌的构建方法,其特征在于:所述步骤四中,

所述表达宿主为大肠杆菌BL21(DE3)。

9.如权利要求1所述的多功能海藻多糖裂解酶基因在褐藻胶降解中的应用。

10.如权利要求9所述的多功能海藻多糖裂解酶基因在褐藻胶降解中的应用,其特征在于:所述的多功能海藻多糖裂解酶基因表达的多功能海藻多糖裂解酶具有水解海藻酸钠、κ-卡拉胶、ι-卡拉胶和琼脂的特性。

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