[发明专利]一种SIRPα融合蛋白及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种SIRPα融合蛋白及其制备方法和用途，该融合蛋白包含：SIRPα的V结构域，以及具有效应子功能的Fc段；所述的V结构域包含：氨基酸序列SEQ ID No.1；所述的Fc段包含：人体IgG1或IgG4抗体的恒定区。本发明的融合蛋白增强了SIRPα与CD47的亲和力、体内半衰期、以及Fc段介导的效应子功能，能够强烈地诱导巨噬细胞针对多种肿瘤细胞的吞噬作用。

技术领域

本发明涉及一种融合蛋白，具体涉及一种SIRPα融合蛋白及其制备方法和用途。

背景技术

逃避免疫系统的杀伤作用是肿瘤的特征之一。近年来，利用机体原有的免疫反应对抗肿瘤逐渐成为新的治疗策略，根据不同机理疗法应用的时间先后排序，主要包括非特异性免疫刺激、免疫检验点单抗、过继细胞回输、单克隆T细胞受体疗法、CD47单抗、肿瘤疫苗等，无论在试验阶段还是在临床应用中都是最具前景的疗法之一。通常情况下，巨噬细胞可渗透到肿瘤体中，其抗肿瘤的效果可以被利用而使病人受益。

CD47也被称为整合素相关蛋白（Integrin Associated Protein，IAP），是免疫球蛋白超家族成员。CD47广泛的表达于细胞的表面，可与信号调节蛋白α（Signal RegulatoryProtein α, SIRPα）、血小板反应蛋白（Thrombospondin-1, TSP1），以及整合素（integrins）相互作用，介导凋亡、增殖、免疫等一系列的反应。

已有研究显示，CD47作为抗吞噬效应的“别吃我”信号分子，几乎所有的肿瘤细胞和组织都高表达CD47，且是对应正常细胞和组织的3倍，其可避免细胞被巨噬细胞识别与杀伤。另外，当采用抗体进行治疗时，CD47的表达也限制了Fc段受体介导的吞噬作用。

研究发现CD47直接与巨噬细胞表面调节性糖蛋白SIRPα结合而发挥对肿瘤的保护功能。SIRPα作为抑制性受体，与CD47交互作用时，负向调节巨噬细胞的骨架强度，减弱其吞噬能力。SIRP α胞外结构域与CD47结合，通过胞内区域传递信号，其NH₂端V型结构参与CD47结合的调控。

目前，抗CD47治疗的临床前研究涵盖了非霍奇金淋巴瘤（Anti-CD47 antibodysynergizes with rituximab to promote phagocytosis and eradicate non-Hodgkinlymphoma[J]. Cell, 2010, 142(5): 699-713）、乳腺癌（The CD47-signal regulatoryprotein alpha (SIRPα) interaction is a therapeutic target for human solidtumors[J]. Proc Nat Acad Sci U S A, 2012, 109(17): 6662-6667）、卵巢癌（In vitroapplication of anti-CD47 monoclonal antibody for targeted therapy of ovariancancer[J]. Chinese Journal of Clinical Oncology, 2013, 40(8): 440-443）、非小细胞肺癌（CD47-blocking immunotherapies stimulate macrophage-mediateddestruction of small-cell lung cancer[J]. J Clin Invest, 2016, 126(7): 2610-2620）等多种肿瘤。

目前，已经有相关的抗-CD47抗体药物进入临床Ⅰ期研究，Hu5F9-G4是Forty Seven公司研发的一种抗-CD47的单克隆抗体，其对CD47具有较好的亲和力(nM级别)。