[发明专利]一种三链DNA分子信标结合纳米孔技术联用的抗体检测方法

权利要求书

1.一种用于检测目标抗体的分子组合，包括探针分子和抗体捕获分子；

所述探针分子是将瓜环修饰于单链DNA分子I的5’末端得到的；单链DNA分子I中，3’端具有由n个核苷酸组成的结合区A；

所述抗体捕获分子由单链DNA分子II和两个抗原分子组成；单链DNA分子II位于中间，单链DNA分子II的两个末端分别连接一个与目的抗体对应的抗原分子；DNA分子II中，5’端具有由n个核苷酸组成的结合区B，3’端具有由n个核苷酸组成的结合区C；

结合区B和结合区C为反向序列；结合区B与结合区A为反向互补序列。

2.一种用于检测目标抗体的复合物，由探针分子和抗体捕获分子共孵育形成；

所述探针分子是将瓜环修饰于单链DNA分子I的5’末端得到的；单链DNA分子I中，3’端具有由n个核苷酸组成的结合区A；

所述抗体捕获分子由单链DNA分子II和两个抗原分子组成；单链DNA分子II位于中间，单链DNA分子II的两个末端分别连接一个与目的抗体对应的抗原分子；DNA分子II中，5’端具有由n个核苷酸组成的结合区B，3’端具有由n个核苷酸组成的结合区C；

结合区B和结合区C为反向序列；结合区B与结合区A为反向互补序列。

3.如权利要求1所述的分子组合或权利要求2所述的复合物，其特征在于：

所述n为6-10之间的任意自然数；

所述单链DNA分子I的长度为18-22bp；

所述单链DNA分子II的长度为33-41bp。

4.如权利要求1至3任一所述的分子组合，或，权利要求2或3所述的复合物，其特征在于：

所述n为8；

所述单链DNA分子I的长度为20bp；

所述单链DNA分子II的长度为37bp。

5.权利要求1至4任一所述的分子组合，或，权利要求2至4任一所述的复合物，其特征在于：所述能够将瓜环与DNA分子连接的化合物为二茂铁。

6.权利要求1至5任一所述的分子组合，或，权利要求2至5任一所述的复合物，其特征在于：所述单链DNA分子I如序列表的序列1所示；所述单链DNA分子II如序列表的序列2所示。

7.一种系统，包括权利要求1至6任一所述的分子组合和样品池系统；

所述样品池系统包括两个隔室，两个隔室被聚四氟乙烯膜分隔；所述聚四氟乙烯膜中间具有一个直径为100-150μM的孔，所述通孔被磷脂双分子层充满，在所述磷脂双分子层中存在一个由α-溶血素七聚体蛋白形成的纳米孔；样品池系统中应用Ag/AgCl电极组成闭合回路。

8.一种系统，包括权利要求2至6任一所述的复合物和样品池系统；

所述样品池系统包括两个隔室，两个隔室被聚四氟乙烯膜分隔；所述聚四氟乙烯膜中间具有一个直径为100-150μM的孔，所述通孔被磷脂双分子层充满，在所述磷脂双分子层中存在一个由α-溶血素七聚体蛋白形成的纳米孔；样品池系统中应用Ag/AgCl电极组成闭合回路。

9.权利要求1至6任一所述的分子组合，或，权利要求2至6任一所述的复合物，或，权利要求7或8所述的系统在检测目的抗体中的应用。

10.一种检测样本中目的抗体的方法，包括如下步骤：将待测样本与权利要求2至6任一所述的复合物共同孵育后加入权利要求7或8中所述的样品池系统中，通过分析是否产生特征电信号实现对目的抗体的检测。