[发明专利]hCG周期检测试纸、试剂盒及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种hCG周期检测试纸，其特征在于，包括第一试纸条和第二试纸条，所述第一试纸条和第二试纸条分别包括：

基片以及在所述基片上依次粘附的上样垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫，且所述上样垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫之间，依次与且仅与相邻部位相接触且部分重叠；所述抗体承载膜上设置有相间隔的检测线和质控线，所述检测线靠近所述胶体金吸附垫，所述质控线靠近所述吸水垫；其中，

所述第一试纸条的胶体金吸附垫上吸附的是胶体金-抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体结合物；所述第二试纸条的胶体金吸附垫上吸附的是胶体金-抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体结合物和游离β抗体；

所述检测线包被有抗人绒毛膜促性腺激素α-hCG单克隆抗体；所述质控线上包被有抗鼠IgG多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的hCG周期检测试纸，其特征在于，所述抗体承载膜为孔径为3um～10um的硝酸纤维素膜。

3.根据权利要求1或2所述的hCG周期检测试纸，其特征在于，所述上样垫和所述吸水垫上均设置有保护膜。

4.一种制备权利要求1-3任一项所述的hCG周期检测试纸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S10：将抗体承载膜包被检测线和质控线，所述检测线与质控线平行且间距为0.3-0.7cm，在4-35℃恒温条件下干燥备用；

S20：将S10步骤得到的抗体承载膜使用PBS缓冲液浸泡处理后使用封闭处理液浸泡处理，在18-28℃，相对湿度≤40％条件下干燥处理，备用；

S30：配制胶体金复溶液并调节PH值为6.5-7.0，加入抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体，之后加入稳定剂混合均匀，离心并收集沉淀，使用所述胶体金复溶液复溶，浇制在所述第一试纸条的胶体金吸附垫上，干燥，密封保存，备用；

S40：配制胶体金复溶液并调节PH值为6.5-7.0，加入抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体后加入稳定剂混合均匀，离心并收集沉淀，使用所述胶体金复溶液复溶，之后加入游离β抗体混合均匀，浇制在所述第二试纸条的胶体金吸附垫上，干燥，密封保存，备用；

S50：将上样垫、所述第一试纸条的胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫沿所述基片的长度方向上依次粘附得到第一试纸条；将上样垫、所述第二试纸条的胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫沿所述基片的长度方向上依次粘附得到第二试纸条。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，包被所述检测线所使用的抗人绒毛膜促性腺激素α-hCG单克隆抗体浓度为1.1-1.5mg/mL；包被所述质控线所使用的抗鼠IgG多克隆抗体浓度为1.5-2.5mg/mL。优选的，包被所述检测线所使用的抗人绒毛膜促性腺激素α-hCG单克隆抗体浓度为1.3mg/mL；包被所述质控线所使用的抗鼠IgG多克隆抗体浓度为2mg/mL。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述封闭处理液包括：0.08-0.12Mol缓冲液、质量百分含量0.3-0.7％的糖份、质量百分含量0.8-1.2％的封闭蛋白、质量百分含量0.03-0.08％的防腐剂。优选的，0.1Mol缓冲液、质量百分含量0.5％的糖份、质量百分含量1％的封闭蛋白和质量百分含量0.05％的防腐剂。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，所述糖份为蔗糖或海藻糖，所述防腐剂为NaN₃或硫柳汞，所述封闭蛋白为络蛋白或牛血清白蛋白。

8.根据权利要求4-7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述S30步骤中抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体的浓度为5μg/mL。

9.根据权利要求4-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述S40步骤中抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体的浓度为5μg/mL，所述游离β抗体与所述抗人绒毛膜促性腺激素β-hCG单克隆抗体的质量比为10∶1。