[发明专利]一种光控基因表达系统及其应用在审
申请号: | 201810204319.4 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108531495A | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
发明(设计)人: | 孙东昌;程峰;王远山;汤晓玲;葛璟燕;李骏 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12N1/06;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞裂解 基因表达系统 光控 基因 启动子表达 细胞培养 应用 强碱 环境污染治理 基因诱导表达 化学诱导剂 转录终止子 高温高压 光控系统 时空条件 诱导细胞 高污染 光诱导 基因组 有效地 裂解 调控 | ||
1.一种光控基因表达系统,其特征在于所述光控基因表达系统是由yf1基因、fixJ基因和egfp基因组成,所述yf1基因采用BBa_J23100启动子表达,所述egfp基因采用P’FixK2启动子表达,并在fixJ基因和egfp基因后分别添加BBa_B0015转录终止子。
2.如权利要求1所述光控基因表达系统,其特征在于所述光控基因表达系统核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。
3.一种权利要求1所述光控基因表达系统在细胞可控培养中的应用。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述应用是将细胞裂解基因与光控基因表达系统共同导入宿主菌,在37℃进行细胞培养,若光诱导培养,则实现细胞生长;若避光培养,则实现细胞裂解。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述细胞裂解基因为lys基因。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于所述光控基因表达系统在导入宿主菌前,先将光控基因表达系统导入质粒pUC57后再导入宿主菌。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述宿主菌构建方法为:将光控基因表达系统导入载体pUC57,获得重组质粒pZJUTiGEM0001;将细胞裂解基因lys转入质粒pUC57,酶切后与含阿拉伯糖启动子的载体pGLO连接,获得重组质粒pGLO-lys;将lys基因从重组质粒pGLO-lys上克隆至重组质粒pZJUTiGEM0001后转入宿主菌。
8.如权利要求4所述应用,其特征在于所述的细胞培养是将宿主菌置于光诱导装置中进行培养;所述光诱导装置由筒体和遮光盖构成,所述筒体内壁设有可控光源,筒体顶部设有固定微生物培养瓶的支撑架,所述微生物培养瓶的瓶口有遮光塞,所述支撑架和微生物培养瓶与筒体内壁遮光配合。
9.如权利要求8所述应用,其特征在于所述可控光源为40W的LED蓝光灯。
10.如权利要求8所述应用,其特征在于所述光诱导装置在摇床中180rpm条件下培养。
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