[发明专利]一种芪参益气滴丸中丹参多酚酸成分含量测定方法

说明书

本发明涉及一种芪参益气滴丸中丹参多酚酸成分含量测定方法，所述方法包括以下步骤：A对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成丹参素钠的对照品溶液；B供试品溶液制备:取芪参益气滴丸，精密称定，超声溶解，定容，滤过，取续滤液，即得；C测定：分别精密吸取步骤A所得的对照品溶液及步骤B供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图采用归一法计算芪参益气滴丸中丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A的含量。

技术领域：

本发明涉及一种中药成分的含量测定方法，特别涉及一种芪参益气滴丸中丹参多酚酸成分含量测定方法。

背景技术：

芪参益气滴丸为天士力心血管疾病用药市场布局的重要产品，常用于气虚血瘀型胸痹、症见胸闷胸痛，气短乏力，心悸、面色少华、自汗、舌体胖有齿痕、舌质暗或紫暗有瘀斑，脉沉或沉弦，适用于冠心病心绞痛见上述证候者，与我公司复方丹参滴丸起到相互补充作用。

芪参益气滴丸处方由丹参、三七、黄芪、降香四味组成，其中丹参药材富含多种酚酸类化合物，文献研究表明，酚酸类化合物尤其是丹酚酸L/M具有显著的抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白的氧化以及预防心血管疾病的作用，是芪参益气滴丸中主要有效成分之一，也是重点质量控制指标。现行质量标准中采用HPLC(高效液相色谱)法对芪参益气滴丸中丹参素含量进行定量控制，也未对丹酚酸L/M进行检测。丹酚酸L/M在芪参益气滴丸中起着很重要的作用，文献报道，具有抗氧化、清除自由基、抑制血小板聚集和抗血栓形成等药理作用

本发明于采用UPLC对芪参益气滴丸丹参中多种酚酸类成分进行研究，结合指纹图谱技术，以单一对照品(丹参素钠)为参照，利用随行线性试验计算校正因子，并以校正因子对丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A四种成分进行含量测定，建立丹参多酚酸指纹图谱和利用单一对照品同时定量多个成分的(一测多评)含量测定检测方法，以达到全面控制产品质量的目的。

通过文献及专利查阅，与芪参益气滴丸相关专利包括药理作用、制剂工艺、药材提取和成分测定等四个方面，其中涉及有效成分测定的共有2篇，分别为《一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法》(CN103926366B)、《快速检测滴丸剂有效成分含量的近红外漫反射光谱法》(CN1982874B)。专利《一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法》中申报了关于芪参益气滴丸中三七、黄芪、降香三味成分的薄层鉴别方法和丹参中丹参素成分的HPLC含量测定方法，《快速检测滴丸剂有效成分含量的近红外漫反射光谱法》中采用近红外光谱法对芪参益气滴丸制剂中有效成分进行检测，以上两种检测方法仅控制丹参素含量，对有效成分的控制较为单一；另有文献《芪参益气滴丸多维指纹图谱研究》(陈慧贞，浙江大学硕士学位论文)中对芪参益气滴丸中丹参成分进行指纹图谱研究，但并未对其中成分进行定量。相比以上专利及相关文献中方法，本发明的分析方法其特点主要在于在同一次分析中可以将芪参益气滴丸丹参中的成分同时进行定性及定量的测定，在定量的过程中仅使用一种对照品即可实现4种成分的测定，较之以往发表论文及申请专利的分析方法，本方法具有提高分析效率、降低人力物力等成本的优势。

发明内容：

本发明提供一种芪参益气滴丸中丹参多酚酸成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤

A对照品溶液制备:取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成丹参素钠的对照品溶液；

B供试品溶液制备:取芪参益气滴丸，精密称定，超声溶解，定容，滤过，取续滤液，即得；

C测定：分别精密吸取步骤A所得的对照品溶液及步骤B供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图使用相对校正因子计算芪参益气滴丸中丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A的含量；

其中所述超高效液相色谱的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸水溶液为流动相A；以乙腈溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱：

表1，流动相梯度洗脱表