[发明专利]一种胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用

说明书

本申请公开了一种胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用。本申请的胶体金免疫层析试纸，包括依序搭接在PVC底板上的样品垫、标记垫、层析条和吸水纸，其中，层析条以反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜为固相载体。本申请的胶体金免疫层析试纸，采用反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜替换传统的硝酸纤维素膜，不仅提高了胶体金免疫层析试纸的检测灵敏度，同时也能降低假阳性和假阴性等非特异性结合，而且，有效降低了背景信号干扰，提高了信噪比和分辨率，缩短了反应时间，还可较大的降低捕获抗体包被浓度，降低试剂成本，为心肌损伤标志物胶体金免疫层析试纸检测技术提供了一种新的灵敏度高、重复性好的胶体金免疫层析试纸。

技术领域

本申请涉及胶体金免疫层析试纸检测领域，特别是涉及一种胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用。

背景技术

急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)是临床最常见、最危重的心脏急症之一，也是导致患者住院和死亡的主要原因。心肌标志物作为心肌损伤的筛查、诊断、评定预后和随访治疗效果的标志，可用于包括急性冠心病、急性心肌梗死、急性心肌炎等急性心肌损伤性疾病临床检测。目前，用于分析检测心肌损伤标志物的技术有很多，放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)，酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)和化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)等分析方法。这些分析方法灵敏度高、重复性好，但存在样品前处理复杂、操作繁琐、耗时、成本高、需要大型仪器设备和专业人员支持等不足，并且还不能同时检测多个标志物，这些因素极大的限制了以上分析方法在床旁快速检测(point-of-care,POCT)的应用。

胶体金免疫层析技术(Gold immunochromatographic assay,GICA)是一种将胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术。它的原理是：以条状的硝酸纤维素膜材料为固相载体，通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动，并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的抗原或抗体受体发生高特异性、高亲和性的免疫反应，层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域，即检测带，游离待测物则越过检测带达到分离的效果，然后运用可目测的标记物胶体金得到直观的实验现象或结果。与RIA、ELISA和CLIA等分析方法相比，胶体金免疫层析法具有操作简单、快速、成本低、无需大型仪器，也无需专业人员操作等优点，并且，可以实现采样现场即时检测，即实现床旁快速检测，被广泛应用于医学诊断和治疗监测、司法科学、环境监测和食品安全等领域中标志物的识别和检测。

目前，急性心肌梗死检测的主要方法是，定量检测人血清、血浆和全血样本中的心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Myo)三种心肌损伤生物标志物。而目前市面上也不乏可同时检测cTnI、CK-MB和Myo三种心肌损伤生物标志物的多靶标胶体金免疫层析试纸，这些多靶标快速分析试纸在一定程度上有助于临床上对AMI的早期诊断，但仍然存在两个方面的不足：一是灵敏度不足，抗原抗体等原料对免疫试剂的性能起着决定性的作用，合适的原料可以从根本上提升试剂的性能，因此原材料筛选是开发高灵敏免疫检测试剂的关键步骤；二是重复性不理想，检测结果的可重现性是临床工作者评估试剂性能最关注的指标之一，良好的重复性也为临床工作者评估和判断患者病情提供了进一步的依据。而现有的多靶标胶体金免疫层析试纸无论是灵敏度还是重复性都难以满足临床使用需求。因此，缺乏高灵敏度、高精密性的心肌损伤标志物胶体金免疫层析试纸检测技术是亟待解决的重大问题。

发明内容

本申请的目的是提供一种新的胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：

本申请的一方面公开了一种胶体金免疫层析试纸，包括依序搭接在PVC底板上的样品垫、标记垫、层析条和吸水纸，其中，层析条以反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜为固相载体。