[发明专利]一种免疫荧光层析试纸及其制备方法和应用在审
申请号: | 201810206451.9 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108318690A | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 谢妮;何盛南;张赛;徐鹏 | 申请(专利权)人: | 深圳市第二人民医院 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/543;G01N33/533;G01N33/68;G01N33/573 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 李小焦;彭家恩 |
地址: | 518037 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 层析试纸 免疫荧光 制备方法和应用 反蛋白石结构 光子晶体薄膜 硝酸纤维素 层析条 申请 心肌损伤标志物 非特异性结合 硝酸纤维素膜 检测灵敏度 背景信号 捕获抗体 固相载体 检测技术 试剂成本 标记垫 传统的 假阳性 假阴性 灵敏度 吸水纸 信噪比 样品垫 分辨率 包被 搭接 替换 | ||
1.一种免疫荧光层析试纸,包括依序搭接在PVC底板上的样品垫、标记垫、层析条和吸水纸,其特征在于:所述层析条以反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜为固相载体。
2.根据权利要求1所述的免疫荧光层析试纸,其特征在于:所述标记垫上喷涂有荧光微球标记的抗cTnI单克隆抗体、荧光微球标记的抗CK-MB单克隆抗体、荧光微球标记的抗Myo单克隆抗体,以及荧光微球标记的亲和素。
3.根据权利要求2所述的免疫荧光层析试纸,其特征在于:所述标记垫上,荧光微球标记的抗cTnI单克隆抗体的浓度为0.1~1.0mg/mL,按照稀释比例为5%~20%稀释后,喷量为3~6μL/cm喷涂至标记垫上;
荧光微球标记的抗CK-MB单克隆抗体的浓度为0.1~1.0mg/mL,按照稀释比例为5%~20%稀释后,喷量为3~6μL/cm喷涂至标记垫上;
荧光微球标记的抗Myo单克隆抗体的浓度为0.1~1.0mg/mL,按照稀释比例为5%~20%稀释后,喷量为3~6μL/cm喷涂至标记垫上;
荧光微球标记的亲和素的浓度为0.1~1.0mg/mL,按照稀释比例为0.5%~5%稀释后,喷量为3~6μL/cm喷涂至标记垫上。
4.根据权利要求2或3所述的免疫荧光层析试纸,其特征在于:所述反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜上包被有三条检测线和一条质控线,三条检测线分别为cTnI检测线、CK-MB检测线和Myo检测线;
所述cTnI检测线包被有与所述荧光微球标记的抗cTnI单克隆抗体处于不同表位的另一种抗cTnI单克隆抗体,所述CK-MB检测线包被有与所述荧光微球标记的抗CK-MB单克隆抗体处于不同表位的另一种抗CK-MB单克隆抗体,所述Myo检测线包被有与所述荧光微球标记的抗Myo单克隆抗体处于不同表位的另一种抗Myo单克隆抗体;
所述质控线包被有特异性识别亲和素的兔抗亲和素抗体。
5.根据权利要求4所述的免疫荧光层析试纸,其特征在于:所述cTnI检测线上,与所述荧光微球标记的抗cTnI单克隆抗体处于不同表位的另一种抗cTnI单克隆抗体的浓度为0.1~0.5mg/mL,喷量为0.1~0.2μL/mm喷涂至cTnI检测线上;
所述CK-MB检测线上,与所述荧光微球标记的抗CK-MB单克隆抗体处于不同表位的另一种抗CK-MB单克隆抗体的浓度为0.1~0.5mg/mL,喷量为0.1~0.2μL/mm喷涂至CK-MB检测线上;
所述Myo检测线上,与所述荧光微球标记的抗Myo单克隆抗体处于不同表位的另一种抗Myo单克隆抗体的浓度为0.1~0.5mg/mL,喷量为0.1~0.2μL/mm喷涂至Myo检测线上;
所述质控线上,所述兔抗亲和素抗体的浓度为0.1~0.5mg/mL,喷量为0.1~0.2μL/mm喷涂至质控线上。
6.根据权利要求2-5任一项所述的免疫荧光层析试纸,其特征在于:所述荧光微球标记中所采用的荧光微球的粒径为100~500nm,所述荧光微球的激发波长为310~550nm,发射波长为340~620nm。
7.根据权利要求1-6任一项所述的免疫荧光层析试纸在制备检测心肌标志物的装置或试剂盒中的应用;
或者在制备急性心肌损伤性疾病临床检测试剂盒或装置中的应用,所述急性心肌损伤性疾病包括但不仅限于急性冠心病、急性心肌梗死或急性心肌炎。
8.反蛋白石结构硝酸纤维素光子晶体薄膜在免疫荧光层析试纸中的应用。
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