[发明专利]一种发酵培养基及高效表达蛋白的发酵方法在审
| 申请号： | 201810209274.X | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108148770A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 孟勇;鲁进;尤雅;高怀春;钱美会;杨滔 | 申请（专利权）人： | 绵阳禾本生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/16 | 分类号： | C12N1/16;C12N9/00;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李进 |
| 地址： | 621000*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 发酵 发酵培养基 高效表达 蛋白 培养基 无机盐 重量百分比 菌体接种 菌液接种 稳定因素 可控性 酶制剂 菌液 摇瓶 | ||
1.一种发酵培养基，其特征在于，按重量百分比计，包括：
碳源3～6％，无机盐2.5～4.5％，PTM10.4～1.2％，余量的水。
2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，按重量百分比计，所述无机盐包括磷酸二氢钾1～2％，硫酸镁1～2％，硫酸铵0.5～1.5％。
3.一种高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，包括：
将菌体接种至装有第一培养基的摇瓶中进行培养，使菌液的光密度值不小于10；
将所述菌液接种至含有如权利要求1或2所述的发酵培养基的第一培养罐中进行发酵。
4.根据权利要求3所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基的pH值为5.2～5.6，所述发酵培养基在120～122℃的条件下灭菌25～35min。
5.根据权利要求3所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，将所述菌液接种到所述第一培养罐后，在风量为30～40m3/h、温度为29～30℃、初始发酵pH值为4.7～4.9、转速为140～160rpm的条件下发酵培养。
6.根据权利要求5所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，所述菌液接种到所述第一培养罐发酵培养22～26h后，将所述第一培养罐中的第一种子液接种至含有所述发酵培养基的第二培养罐中发酵培养。
7.根据权利要求6所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，所述第一种子液接种至所述第二培养罐后，在风量为340～360m3/h、温度为29～30℃、初始发酵pH值为4.7～4.9、转速为170～180rpm的条件下发酵培养。
8.根据权利要求7所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，所述第一种子液接种至所述第二培养罐发酵培养9～12h后，将所述第二培养罐中的第二种子液接种至含有所述发酵培养基的第三培养罐中发酵培养。
9.根据权利要求8所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，所述第二种子液接种至所述第三培养罐后，在风量为1800～2100m3/h、温度为29～30℃、初始发酵pH值为4.7～4.9、转速为120～140rpm的条件下发酵培养；
优选地，发酵培养过程中，采用氨水调节发酵液的pH值。
10.根据权利要求3所述的高效表达蛋白的发酵方法，其特征在于，当所述第一培养罐内的发酵液的pH值回升、所述发酵液的湿重大于100g/L后，进入补料阶段，所述补料阶段结束后进入诱导阶段。
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