[发明专利]一种DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，包括以DHAV-3型合成多肽W7包被的ELISA板；所述合成多肽W7的氨基酸序列结构为N-SRNHRPFRFCLRLKT-CooH。

2.根据权利要求1所述的DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述合成多肽W7包被的ELISA板的制备方法为：用pH9.6的0.05M碳酸盐缓冲液作包被液，将所述合成多肽W7稀释至浓度为1μg/mL，按100μL/孔剂量加入至ELISA反应板中，于37℃下作用2小时，并于4℃包被过夜，拍干后用Porcine skin Gelatin于37℃封闭2小时，以pH7.4、含浓度0.05％吐温-20的PBS进行洗涤，拍干并待其干燥后装入含干燥剂的包装袋保存，备用。

3.根据权利要求1或2所述的DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括样品稀释液、10×浓缩洗涤液、酶结合物工作液、显色液、终止液、阳性对照和阴性对照。

4.根据权利要求3所述的DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

5.根据权利要求4所述的DHAV-3型多肽间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于：

所述样品稀释液为含浓度0.05％吐温-20的0.01M的磷酸盐缓冲液，pH7.4；

所述10×浓缩洗涤液 为含浓度0.5％吐温-20的0.1M的磷酸盐缓冲液，pH7.4；

所述酶结合物工作液为HRP-羊抗鸭IgG；

所述显色液为体积比1：1的浓度0.2mg/mL四甲基联苯胺溶液和含浓度0.5‰过氧化氢尿素的柠檬酸-磷酸盐缓冲液的混合液；

所述终止液为浓度0.31％氢氟酸溶液；

所述阳性对照为经筛选获得的DHAV-3阳性血清，其OD_650nm≥1.0，并加入1000U/mL的青链霉素；

所述阴性对照为经筛选获得的阴性血清，其OD_650nm≤0.25，并加入1000U/mL的青链霉素。