[发明专利]一种基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法

权利要求书

1.一种基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，将高山被孢霉菌株经过试管斜面培养基和摇瓶培养基逐级放大培养，制备种子液，然后接种于发酵罐中进行发酵培养，其特征在于：在发酵过程中，以控制高山被孢霉胞内活性氧浓度为目标，对发酵过程进行分阶段调控，将整个发酵过程分为相对高活性氧期和相对低活性氧期2个阶段；在相对高活性氧期，通过添加活性氧源，将胞内活性氧浓度由65 RFLU提升至100~125 RFLU，刺激细胞加速生长；在相对低活性氧期通过抗氧化物质添加及间歇性低氧，降低胞内活性氧浓度由350 RFLU至200 RFLU左右，减少细胞产物损耗；

所述相对高活性氧期为高山被孢霉发酵的指数生长期，即0 ~ 60小时，所述相对低活性氧期为高山被孢霉发酵的61 ~ 168小时；

所述相对高活性氧期添加活性氧源，添加时间为迟缓期结束后，即8 ~ 12小时。

2.根据权利要求1所述的基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其特征在于：所述活性氧源为过氧化氢、纳米二氧化钛粒子、纳米铁粒子。

3.根据权利要求1所述的基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其特征在于：所述相对高活性氧期添加活性氧源，添加后培养基中活性氧源浓度为50 ~100 μmol/L。

4.根据权利要求1所述的基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其特征在于：所述相对低活性氧期的间歇性低氧是添加抗氧化剂，添加时间点分别为60小时和120小时。

5.根据权利要求1所述的基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其特征在于：所述相对低活性氧期的间歇性低氧是通过控制通气与转速来实现，以12 ~ 18小时为一个周期，每周期降低搅拌速率及通气，使环境溶氧降低50 ~ 80%，造成15 ~ 120min间歇性低氧环境。

6.根据权利要求1所述的基于活性氧调控高山被孢霉发酵产花生四烯酸油脂的方法，其特征在于：所述相对低活性氧期添加的抗氧化剂为抗坏血酸钠、芝麻酚、胡萝卜素，单次添加量为5 ~ 10 g/L。