[发明专利]一种多肉植物月光寿的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种多肉植物月光寿的组织培养方法，包括以下步骤：挑选健康月光寿叶片清洗、消毒后，获得无菌外植体；将无菌外植体切段后接种到诱导愈伤组织培养基中进行愈伤组织的诱导；然后将愈伤组织切割成小块转入不定芽分化培养基中分化培养，获得丛生芽；最后将丛生芽单株分株后转入生根培养基中培养，获得带根的完整植株。本发明通过对月光寿叶片组织进行离体培养获得月光寿的组培苗，克服了多肉植物受到时间季节限制，取材短缺的局限性。该方法材料易得，消毒方便，成活率高，并能较好的保持月光寿品系优势，能快速大量繁殖出大量适合移栽的优良月光寿幼苗。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种多肉植物月光寿的组织培养方法。

背景技术

月光寿为百合科十二卷属多肉植物，原产非洲南部。月光寿叶面光滑，叶型为半丸叶型，植株整体看起来不会呈现圆球形。叶面肥大，窗门透亮，窗面上有翠绿色曲线放射状纹路，叶基部及叶背为翠绿色，清新养眼，用小盆栽种可作为生活中的工艺品，放置办公室、客厅、卧室、书房，卫生间、餐厅、窗台、阳台等处，清新典雅。多肉植物月光寿是近年来人气较旺的小型多肉植物品种之一，越来越受到多肉植物爱好者的青睐。但由于十二卷属植物具有自交不亲和性，故大多采用分株、叶插等方法繁殖。但这些方法繁殖率低、繁殖方法易损害母株生长、且小苗不易成活且生长缓慢，加之场地要求大，人工成本较高，严重影响了多肉植物月光寿的繁殖，从而影响了其经济效益。因此，提高多肉植物月光寿的生产效率、缩短培育时间、降低人工成本成为目前亟待解决的问题。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种多肉植物月光寿的组织培养方法，可以实现多肉植物月光寿的快速繁殖，大大缩短了人工成本，极大的提高了生产效率。

为了实现本发明的目的，本发明采用以下技术方案：

一种多肉植物月光寿的组织培养方法，包括以下步骤：

D1外植体选择与消毒：挑选健康月光寿叶片，用自来水流水冲洗，然后将其置于超净工作台中，用75%酒精消毒30 s，再用0.1% 氯化汞浸泡6 min，每次浸泡后都用灭菌水洗涤，最后用无菌滤纸吸干表面水分，获得无菌外植体。

D2愈伤组织诱导：将无菌外植体切割成0.5～1.0 cm的切片，接种到诱导愈伤组织培养基中，在温度为25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的环境下培养90～120 d，诱导出愈伤组织；其中诱导愈伤组织培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加1.0～2.0 mg的6-苄基腺嘌呤、0.1～0.2 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0。

D3丛生芽诱导：将愈伤组织切割成0.5～1.0 cm的小块，直接转入不定芽分化培养基中分化培养以获得丛生芽，其中不定芽诱导培养条件为：温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%，培养时间90～120 d，在该培养条件下，愈伤组织分化成不定芽，分化出丛生芽后，连续培养90 d壮苗；所述的不定芽分化培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加0.5～0.8 mg的6-苄基腺嘌呤、0.1～0.5 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0。

D4诱导生根：将丛生芽单株分株后转入生根培养基中，在温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的条件下培养50～60 d，得到带根的完整植株；所述的生根培养基是以1/2 MS培养基为基本培养基，且每1 L的1/2 MS基本培养基中添加0.1～0.15 mg的6-苄基腺嘌呤、1～1.5 mg吲哚丁酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0。