[发明专利]一种量子点生物传感器的制备及对牛血红蛋白的检测方法

权利要求书

1.一种硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)称取一定量的七水合硫酸锌、四水合氯化锰并溶解在一定量的去离子水中，混合物在氮气保护下常温搅拌30分钟；

2)称取一定量的九水合硫化钠并溶解于一定量的去离子水中，将得到的Na₂S溶液逐滴加入到步骤1)中制得的混合溶液中，室温下继续搅拌反应2-3小时；

3)将步骤2)制得的反应产物离心收集，先用体积比1：1的乙醇/水洗涤一次，再用去离子水洗涤一次，将产物冷冻干燥，即可得到硫化锌量子点；

4)称取摩尔比范围为1:1～1:2的L-半胱氨酸和硫化锌量子点，将其溶解在一定量去离子水中，避光常温搅拌反应12小时；

5)将步骤4)制得的反应产物离心收集，先用体积比1：1的乙醇/水洗涤一次，再用去离子水洗涤一次，将产物冷冻干燥后置于4摄氏度冰箱中保存，即可得到L-半胱氨酸修饰的硫化锌量子点，所述L-半胱氨酸修饰的硫化锌量子点粒径为4nm；

6)称取一定量的L-半胱氨酸修饰的硫化锌量子点分散在一定量pH 6.5、浓度为0.02M的磷酸盐缓冲溶液中，加入一定量的牛血红蛋白，置于摇床中常温孵育1小时；

7)称取摩尔比范围为2:4:1.5:1～4:8:3:1的丙烯酰胺、N-异丙基丙烯酰胺、甲基丙烯酸和N,N-亚甲基双丙烯酰胺分散在一定量的磷酸盐缓冲液中，混合均匀后加入步骤6)中混合液，置于摇床中常温孵育1小时；

8)将混合物吹氮气10分钟，并在机械搅拌下加入一定量的过硫酸铵溶液和四甲基乙二胺，在氮气保护下反应24小时；

9)将反应产物离心收集，冷冻干燥备用。

2.根据权利要求1所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法的制备方法，其特征在于：所述步骤1)和2)中七水合硫酸锌：四水合氯化锰：九水合硫化钠的摩尔比范围为10:1:10～15:1:15。

3.根据权利要求2所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法的制备方法，其特征在于：所述步骤1)和2)中七水合硫酸锌：四水合氯化锰：九水合硫化钠的摩尔比范围为12.5:1:12.5。

4.根据权利要求1所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：所述步骤4)中L-半胱氨酸：硫化锌量子点的摩尔比范围为1:1.67。

5.根据权利要求1所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：所述步骤7)中丙烯酰胺：N-异丙基丙烯酰胺：甲基丙烯酸：N,N-亚甲基双丙烯酰胺的摩尔比范围为2.6:5.4:2:1。

6.根据权利要求1所述的一种硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：硫化锌量子点：N,N-亚甲基双丙烯酰胺：过硫酸铵：四甲基乙二胺的摩尔比范围为3.5:3.2:2:1～8:6.4:3:1。

7.根据权利要求6所述的一种硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：硫化锌量子点：N,N-亚甲基双丙烯酰胺：过硫酸铵：四甲基乙二胺的摩尔比范围为5.2:4.4:2.2:1。

8.根据权利要求1所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：还包括步骤10)制备印迹空穴的步骤，加入体积百分比10％乙酸-乙腈混合液，在机械搅拌下洗脱，冷冻干燥备用。

9.根据权利要求8所述的硫化锌量子点表面印迹聚合物的制备方法，其特征在于：洗脱后，所述硫化锌量子点表面印迹聚合物颗粒粒径为6nm。