[发明专利]FGF2与TGF-β1融合基因在促进蚕丝细胞增殖活性和抗炎功能中的应用及方法有效
| 申请号： | 201810214294.6 | 申请日： | 2018-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN108486153B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 夏庆友;王峰;王元成;许胜;田弛;赵萍 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/62;C12N5/10;A01K67/04;A61L15/44;A61L15/32 |
| 代理公司： | 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 | 代理人： | 王贵君 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | fgf2 tgf 融合 基因 促进 蚕丝 细胞 增殖 活性 功能 中的 应用 方法 | ||
1.制备促进细胞增殖活性和抗炎功能蚕丝的方法，其特征在于，包括如下步骤：将FGF2与TGF-β1融合基因连入家蚕转基因表达载体，获得注射质粒，然后注射蚕卵，培养并筛选转基因家蚕；所述FGF2与TGF-β1融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述制备促进细胞增殖活性和抗炎功能蚕丝的方法，其特征在于：所述转基因表达载体的制备方法如下：将FGF2与TGF-β1融合基因连入经BamHI和NotI酶切的过渡载体pSL1180，然后用AscI单酶切后，回收目的片段后连接到基因表达载体Piggybac，得到注射质粒。
3.根据权利要求1所述制备促进细胞增殖活性和抗炎功能蚕丝的方法，其特征在于，所述注射蚕卵的方法为：质量比1:1配制待注射质粒与含有Piggybac转座酶的Help质粒混合液，在显微镜下，使用显微操纵器和微量注射器将质粒混合液注射入蚕卵中。
4.根据权利要求1所述制备促进细胞增殖活性和抗炎功能蚕丝的方法，其特征在于：所述培养并筛选转基因家蚕是将注射后的蚕卵置于25℃和90％相对湿度下催青11天后得到G0代蚁蚕，以新鲜的桑叶饲养至上蔟，化蛾后自交得到G1代家蚕，待G1代胚胎发育6天后，筛选家蚕胚胎的眼睛和神经中表达DsRed标记基因的家蚕，即获得转基因家蚕。
5.由权利要求1~4任一项所述制备促进细胞增殖活性和抗炎功能蚕丝的方法制得的蚕丝。
6.权利要求5所述蚕丝在制备促进细胞增殖和抗炎的伤口敷料中的应用。
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