[发明专利]一种基于拉曼全谱分析的无损快速胆维丁含量定量方法

说明书

本发明提供一种基于拉曼全谱分析的无损快速胆维丁含量定量方法，其中：步骤1，将胆固醇和维生素混合物与胆维丁配制成不同质量百分比含量胆维丁的样品；步骤2，通过拉曼光谱仪测量上述不同含量胆维丁样品的光谱信号，经过预处理后得到拉曼光谱数据；步骤3，采用多元统计分析方法对预处理后的拉曼光谱全谱数据进行分析处理建立定量分析模型；步骤4，利用已建立的定量分析模型对未知含量的被测样品进行胆维丁定量分析。本发明有效得解决了胆维丁样品拉曼谱峰偏移对定量测量精度的影响；本发明预测分析模型，对不同含量的胆维丁样品实现预测，结果证明了基于拉曼光谱的全谱分析法在胆维丁含量定量分析中的有效性。

技术领域

本发明涉及一种胆维丁含量定量方法，具体地，涉及一种基于拉曼全谱分析的无损快速胆维丁含量定量方法。

背景技术

胆维丁是预防和治疗佝偻病的安全有效的临床常用药物，具有促进钙、磷吸收利用和促进骨正常钙化的作用，其疗效与肌肉注射维生素D相当。为了保证疗效，必须在胆维丁药物的生产过程和成品质量控制中检测胆维丁成分含量，研究无损快速胆维丁含量定量的方法具有重要的意义。

胆维丁原料为晶体，目前仅有少数文献报道其由维生素D₃与胆固醇通过氢键结合形成等摩尔分子加成物，但尚未对其结构进行深入研究。胆维丁由维生素D₃和胆固醇组成，其结构是由维生素D₃与胆固醇在羟基上形成等摩尔非共价键(氢键)结合物，化学反应式为：

氢键键能最大约为200kJ/mol，一般为5-30kJ/mol，比一般的共价键、离子键和金属键键能更小，但强于静电引力。由于氢键不稳定，胆维丁也可分解成游离维生素D₃和胆固醇。因此，维生素D₃和胆固醇既是起始原料，也是降解杂质。

现有的液相方法无法区分游离的维生素D₃和游离的胆固醇，药典标准和目前药厂自拟的质量标准均没有对游离的胆固醇和维生素D₃作为杂质进行控制，现有的含量检测方法所测结果还包括其中的游离态的维生素D₃和胆固醇，无法准确测出胆维丁的真正含量。

另一方面，常用的结构确证手段如红外光谱、紫外吸收光谱、核磁共振、质谱以及元素分析等无法说明胆维丁的物质基础，无法证明氢键的存在。

经检索，目前仅上海上药信谊药厂有限公司药物研究所通过差式扫描量热分析、拉曼光谱及粉末X射线衍射发现了胆维丁原料中存在共晶现象，并对其进行了表征，采用粉末X射线衍射建立了共晶与游离态维生素D₃和胆固醇含量的定量分析方法，其对应申请的专利申请号为201510106721.5，其步骤为：

(1)提供不同胆维丁含量的胆维丁、胆固醇和维生素D3的标准混合物；

(2)提供上述标准混合物的X衍射光谱；

(3)基于上述标准混合物的胆维丁含量以及X衍射光谱中2θ＝4.0°或8.0°的衍射峰高度或面积提供线性回归方程；

(4)提供胆维丁、胆固醇和维生素D₃的混合物的X衍射光谱；以及

(5)基于所述线性回归方程和胆维丁、胆固醇和维生素D3的混合物的X衍射光谱中2θ＝4.0°或8.0°的衍射峰高度或面积确定胆维丁的含量。