[发明专利]枯草芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明涉及一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01及其应用。该菌株的保藏编号为CDMCC NO.60294。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01显著区别于现有已知枯草芽孢杆菌菌株之处包括：(1)该菌株产酶活力高，所产生的蛋白酶包括角蛋白酶、羧肽蛋白酶、氨肽蛋白酶，这几种蛋白酶与普通枯草芽孢杆菌菌株产生的蛋白酶相比能够耐受100℃的温度，并且这些蛋白酶所分解所得苦味肽含量低、发酵产物有很强的风味作用，畜禽适口性很好；(2)该菌株具有肠道细胞黏附能力强的特点，黏附率高到62.78％。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及应用。

背景技术

2013年，农业部2045号公告《饲料添加剂品种目录》中规定能够利用于微生态制剂的芽孢杆菌属种有枯草芽孢杆菌等。枯草芽孢杆菌在一定条件下产生芽孢，对高温、高压、强酸碱、挤压等不良环境的抵抗力很强，并且具有很强的蛋白酶、淀粉酶等活性，是开发新型微生态多功能剂的首选菌种。

目前，枯草芽孢杆菌制品的研究和开发的瓶颈问题是优良菌株的分离和筛选。虽然现有枯草芽孢杆菌菌株具有耐受胃酸、胆汁盐的能力，能够突破动物肠道环境的屏障，并且也能够产生酶，抑菌。但是，现有菌株不能定植于肠道中并大量繁殖，并且产蛋白酶活性低，蛋白酶也不具有耐高温性，并且这些蛋白酶所分解的蛋白质呈苦味，该缺陷使得枯草芽孢杆菌作为添加剂的应用效果欠佳。

发明内容

基于此，本发明的目的之一是提供一种能够黏附于肠道细胞表面的、产蛋白酶活性高且具有耐高温性、分解蛋白无苦味的枯草芽孢杆菌菌株。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明提供一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01，其保藏编号为CDMCCNO.60294。

本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01，为申请人从猪粪中分离得到，其生物学特征如下：菌落表面粗糙起皱，不透明，污白色，菌落圆形，呈火山口状，边缘呈锯齿状，革兰氏阳性菌；芽孢形态为椭圆形到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。

本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01的分子分类地位确定。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01的16S rRNA序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01显著区别于现有已知枯草芽孢杆菌菌株之处包括：(1)该菌株产酶活力高，所产生的蛋白酶包括角蛋白酶、羧肽蛋白酶、氨肽蛋白酶，这几种蛋白酶与普通枯草芽孢杆菌菌株产生的蛋白酶相比能够耐受100℃的温度，并且这些蛋白酶所分解所得苦味肽含量低、发酵产物有很强的风味作用，畜禽适口性很好；(2)该菌株具有肠道细胞黏附能力强的特点，黏附率高到62.78％。

本发明的目的还在提供上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01作为饲料添加剂的应用。

本发明的目的还在于提供一种饲料添加剂，该饲料添加剂以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01或/和其代谢物为活性成分。

在其中一些实施例中，所述饲料添加剂的剂型为粉剂、颗粒剂或液体剂。

在其中一些实施例中，所述饲料添加剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01的培养物以及饲料中可以接受的载体制备而成。

在其中一些实施例中，所述饲料添加剂中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DFS01的活菌数不小于1000亿CFU/g。

本发明的再一目的是提供一种饲料，包含有上述的饲料添加剂。