[发明专利]一种用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括海绵垫和与所述海绵垫连接的β-HCG试纸条及PDG试纸条，所述β-HCG试纸条或所述PDG试纸条分别包括依次连接排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸。

2.如权利要求1所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述β-HCG试纸条的金标垫由玻璃纤维浸泡β-HCG抗体金标结合物和兔IgG金标结合物干燥后制成，所述PDG试纸条的金标垫由玻璃纤维浸泡PDG单抗金标结合物和兔IgG金标结合物干燥后制成。

3.如权利要求1所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述β-HCG试纸条的硝酸纤维素膜靠近所述金标垫的一端设置有由预包被的β-HCG抗体形成的检测区，所述β-HCG试纸条的硝酸纤维素膜靠近所述吸水纸的一端设置有由预包被的羊抗兔IgG抗体形成的质控区。

4.如权利要求1所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述PDG试纸条的硝酸纤维素膜靠近金标垫的一端设置有由预包被的PDG-BSA半抗原形成的检测区，所述PDG试纸条的硝酸纤维素膜靠近所述吸水纸的一端设置有由预包被的羊抗兔IgG抗体形成的质控区。

5.如权利要求1所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述主壳体包括上盖和与上盖相互卡合的下盖，所述上盖上开设有第一视窗和第二视窗。

6.如权利要求5所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒，其特征在于，所述上盖的外表面上还凹设有显示区，所述第一视窗和第二视窗并排开设于所述显示区内。

7.一种用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒的制备方法，其包括以下步骤：

(1)制备胶体金：加热超纯水至沸腾，向沸水中加入10％氯金酸溶液，快速加入10％柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀，保持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水；

(2)制备β-HCG抗体标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，加入一定量的K₂CO₃调节PH，缓慢加入β-HCG抗体，继续搅拌30分钟后，加入10％BSA溶液封闭，离心，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，保存备用；

(3)制备PDG单抗标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，加入一定量的K₂CO₃调节PH，缓慢加入PDG单抗，继续搅拌，加入10％BSA溶液封闭，离心，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，保存备用；

(4)制备兔IgG标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，加入K₂CO₃调节PH，缓慢加入兔IgG，继续搅拌，加入10％BSA溶液封闭，离心，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，保存备用；

(5)将玻璃纤维胶分别浸泡在β-HCG抗体标记溶液、兔IgG标记溶液和PDG单抗标记溶液、兔IgG标记溶液中，干燥后作为金标垫备用；

(6)β-HCG抗体包被：在硝酸纤维素膜上分别包被β-HCG抗体形成检测区，包被羊抗兔IgG形成控制区，干燥后备用；

(7)PDG-BSA半抗原包被：在硝酸纤维素膜上分别包被PDG-BSA半抗原形成检测区，包被羊抗兔IgG抗体，干燥后备用。

8.如权利要求7所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒的制备方法，其特征在于：还包括样品垫处理步骤，样品垫分别用样品垫处理液浸泡处理，干燥后备用。

9.如权利要求7所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒的制备方法，其特征在于：还包括以下步骤，将吸水纸、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次粘贴于PVC板上，2mm重叠，压紧后3.9mm裁条，β-HCG试纸条和PDG试纸条分别装于下盖22上，装上海绵垫40、上盖21及端盖30。

10.如权利要求7所述的用于人体尿液中β-HCG、PDG定量检测的试剂盒的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤，

(1)制备胶体金：加热1L超纯水至沸腾，向沸水中加入1ml 10％氯金酸溶液，快速加入1.5ml 10％柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀，保持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水；

(2)制备β-HCG抗体标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，加入0.1mol/L K₂CO₃调节PH，缓慢加入β-HCG抗体，β-HCG抗体的浓度控制为10ug/ml左右，继续搅拌30分钟后，加入10％BSA溶液封闭15分钟，12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，4℃保存备用；

(3)制备PDG单抗标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，0.1mol/L K₂CO₃调节PH，缓慢加入PDG单抗，PDG单抗的浓度为3.5ug/ml左右，继续搅拌30分钟后，加入10％BSA溶液封闭15分钟，12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，4℃保存备用；

(4)制备兔IgG标记溶液：取一定体积的胶体金溶液，0.1mol/L K₂CO₃调节PH，缓慢加入兔IgG，使其终浓度为4ug/ml，继续搅拌30分钟后，加入10％BSA溶液封闭15分钟，12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，4℃保存备用；

(5)将玻璃纤维胶分别浸泡在β-HCG抗体标记溶液、兔IgG标记溶液和PDG单抗标记溶液、兔IgG标记溶液中，干燥后作为金标垫备用；

(6)β-HCG抗体包被：在硝酸纤维素膜上分别包被β-HCG抗体形成检测区，包被羊抗兔IgG形成控制区，干燥后备用；

(7)PDG-BSA半抗原包被：在硝酸纤维素膜上分别包被PDG-BSA半抗原形成检测区，包被羊抗兔IgG抗体形成控制区，干燥后备用；

(8)样品垫处理：样品垫分别用样品垫处理液浸泡处理，干燥后备用；

(9)将吸水纸、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次粘贴于PVC板上，2mm重叠，压紧后3.9mm裁条，β-HCG和PDG检测试纸条分别装于下盖22上，装上海绵垫40、上盖21及端盖30。