[发明专利]一种同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法

权利要求书

1.一种同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：向发菜培养基内加入2,4-二氯苯氧乙酸。

2.根据权利要求1所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：所述2,4-二氯苯氧乙酸的终浓度为0.03-0.3mg/L。

3.根据权利要求1所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：方法包括以下步骤：

⑴在新鲜无菌的含外源N的BG-11培养基中接入3～10％(v/v)的发菜细胞种子液，于20-30℃恒温，1000-2500lux光照强度条件下进行培养；

⑵分别采用两种方式诱导发菜细胞提高其细胞密度和多糖产量：

向步骤⑴中培养至第4-6天的发菜培养液添加0.1-1mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；

或者，在步骤⑴发菜细胞培养的4-6天，每天向培养基中添加0.03-0.3mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；

⑶培养步骤⑵所述发菜细胞至15-20d结束培养，采用高速离心或筛网过滤的方法分离发菜细胞和发菜培养液的上清液，分别用于收集藻粉和提取胞外多糖。

4.根据权利要求3所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：所述步骤⑴中BG-11培养基所含外源N为1-2g/L的NaNO₃或0.1-1g/L的尿素。

5.根据权利要求3所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：所述步骤⑶所述的发菜胞外多糖的提取步骤如下：

细胞培养液3000-5000rpm离心5-15min，收集上清。上清液减压旋蒸浓缩后，向浓缩液中加入4倍体积无水乙醇，使乙醇终浓度为80％，4℃中过夜醇沉，离心，收集沉淀物，冷冻干燥获得粗胞外粗多糖粉末。

6.根据权利要求3所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：步骤⑶所述的藻粉采用冷冻干燥、50-80℃烘干或喷雾干燥的方法获得。

7.根据权利要求6所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：所述喷雾干燥的进风温度170-230℃,进料浓度70-80g/L,进料速度80-120mL/h。

8.根据权利要求6所述的同时提高发菜细胞密度和多糖产量的方法，其特征在于：所述冷冻干燥的真空压力50-80mTorr，温度-50℃，冻干10h。