[发明专利]壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂

说明书

本发明涉及壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂，所述壬二酸作为佐剂在疫苗中的用量为：每单份疫苗液中含有0.5～3mg的壬二酸。含有壬二酸的佐剂，由5～30μL的浓度为75v/v%的乙醇和0.5～3mg的壬二酸组成。本发明佐剂原料易得，疫苗制备工艺简单，成本低，性能稳定，毒副作用小，在免疫剂量范围内使用是安全可靠的，能够有效的诱导抗原特异性的体液免疫应答，显著增强抗原特异性的体液免疫反应，效果优于无佐剂、单一佐剂组、效果相当铝佐剂。

技术领域

本发明涉及壬二酸的应用、含有壬二酸的佐剂和疫苗剂，属于免疫学领域。

背景技术

疫苗佐剂是当与抗原一起注射或预先注入机体时，可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答的物质，而本身无抗原性的物质。可以在免疫反应低下的人群(如老人、儿童和免疫低下的人)中诱导全面持久的免疫应答。自20世纪初被发现以来，已有使用佐剂来改善以及增强疫苗对机体的免疫应答，比如铝佐剂。但铝佐剂不适于重组蛋白和亚单位疫苗，也会产生不良反应，如炎症，刺激局部产生红斑，肉芽肿，皮下结节，接触性皮炎，IgE介导的超敏反应，铝佐剂也不能诱导细胞毒性T细胞应答。目前，尽管已经有大量新型疫苗佐剂处于研究开发和临床试验阶段，但是真正获得批准用于人类疫苗的佐剂寥寥无几。因此研发新型的疫苗佐剂在疫苗的研发中具有重要的作用。

壬二酸为9碳直链饱和二元酸，亦称为杜鹃花酸、anchoec acid、azelaic acid、1，9-nonanedioic acid、1,7-heptanedicarboxylic acid、lepargylic acid，分子式为C₉H₁₆O₄和(CH₂)₅(CH₂COOH)₂，相对分子质量为188.22，CAS注册号为123-99-9，化合物目录数据库EINECS号码为204-669-1。壬二酸呈白色至微黄色单斜棱晶、针状结晶或粉末。熔点98～103℃，沸点286℃(100mmHg)，闪点215℃，蒸气压0.13kPa(20℃)，相对密度1.03(水20℃)，微溶于冷水(2.4g/L 20℃)，溶于热水、乙醚，易溶于乙醇。

壬二酸是由共生酵母马拉色菌(Malassezia furfur)天然产生的中链二羧酸，马拉色菌是人类和许多其它动物的正常皮肤菌群的一部分，在人体中以低水平存在，摄入的食物来源如小麦，大麦和黑麦。壬二酸是一种具有多种活性的复合分子，随着对其临床应用的不断认识，发现及证实了壬二酸的抗炎、抗感染和抗菌作用。目前，壬二酸在治疗痤疮、黑色素瘤、黄褐斑、酒糟鼻、色素过度沉着及硬化症等方面得到了广泛应用。已经证明壬二酸通过几种途径调节正常人角质形成细胞的炎症反应，包括调节过氧化物酶体增殖物激活受体g和核因子(nuclear factor kB)NF-KB的信号传导途径，调控细胞因子TNF-a、IL-1、IL-6等，这些细胞因子与免疫应答相关，同时观察到促炎细胞因子分泌的抑制作用。壬二酸是体外酪氨酸酶和其他氧化还原酶的可逆抑制剂，抑制线粒体呼吸，也可以抑制厌氧糖酵解。在体外和体内，它对有氧和厌氧(丙酸杆菌)都具有抗菌作用。虽然抗菌活性的确切机制尚待完全阐明，但是壬二酸对代谢，酶活性和细胞内pH都有影响。较低的环境pH也可能增强这种二羧酸的杀菌作用。另外，壬二酸可以抑制活性氧(reactive oxygen species，ROS)从中性粒细胞的释放，也可以通过直接清除作用减少ROS。

目前没有关于壬二酸作为佐剂的相关研究的报道。鉴于壬二酸具有抗菌及抗炎的作用，以及一些研究发现，壬二酸具有抗肿瘤作用，不仅对黑素瘤细胞有抑制作用还对其他肿瘤细胞(如磷癌细胞)也有抑制作用，推测其具备潜在的疫苗佐剂效应。

发明内容

为解决现有疫苗佐剂存在的价格昂贵、注射后副反应严重、促进免疫应答效果不显著等问题，本发明提供壬二酸在制备疫苗佐剂中的应用，以及提供一种经济、有效、安全、稳定的含有壬二酸的佐剂和疫苗剂及其制备方法。