[发明专利]用于对短链核酸转染的SOF纳米基因载体及制备方法和应用在审
| 申请号： | 201810227782.0 | 申请日： | 2018-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN108531512A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 黎占亭;周璐;杨波;张晓丹;张丹维;王辉;刘传志;祁琦;闫萌;赵亚坤 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;陆尤 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纳米基因载体 纳米粒子 转染 制备方法和应用 短链核酸 核酸分子 细胞核 细胞 大小可调 单体分子 多孔特征 芳基吡啶 基因转染 介孔孔道 框架结构 纳米颗粒 四苯甲烷 细胞吞噬 异喹啉盐 治疗基因 负电荷 四面体 盐基团 阳离子 正电荷 自组装 端基 核酸 粒径 吸附 装载 葫芦 扩散 基因 脱离 | ||
1.一种用于对短链核酸转染的SOF纳米基因载体，其特征在于，是以四苯甲烷为核心，端基为芳基吡啶盐基团或者异喹啉盐基团的四面体单体分子与葫芦[8]脲在水相中通过自组装获得SOF纳米粒子，记为Nano-SOF-GD，其粒径在10-300nm之间，大小可调；该SOF纳米粒子具有介孔孔道，作为装载基因的储纳空间。
2.根据权利要求1所述的SOF纳米基因载体，其特征在于，所述SOF纳米粒子的平均粒径在200nm以下，SOF纳米粒子水溶液的浓度在10 μM以下。
3.根据权利要求1所述的SOF纳米基因载体，其特征在于，所述装载的基因为DNA中一种或几种的组合；或者为siRNA中的一种或几种的组合。
4.一种如权利要求1-3之一所述的SOF纳米基因载体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
（1）制备具有不同取代基的四苯甲烷衍生化的四面体单体分子作为四面体结构支点；
（2）通过四面体单体分子与葫芦[8]脲在水相中按照1:2的摩尔比进行自组装，通过超声加热方式助溶，制备得到水溶性纳米SOF基因载体；粒径为10-300nm，记为Nano-SOF-GD。
5.如权利要求1-3之一所述的SOF纳米基因载体在对短链核酸转染中的应用，即将SOF纳米基因载体装载碱基数为21-58 bp的DNA或者siRNA，得到装载核酸的纳米载运系统。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，具体操作如下：
（1）SOF纳米粒子与碱基数为21-58 bp的DNA或者siRNA在水相中混合，置入DMEM培养液中，制备得到负载有DNA或siRNA的纳米基因颗粒，即装载核酸的纳米载运系统；
DNA或siRNA负载量相对于SOF基因载体来说为150-400mg/g；
（2）将步骤（1）得到装载核酸的纳米载运系统，与不同细胞敷育2h后进行转染效果检测。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述装载核酸的纳米载运系统中，四面体单体的浓度为3.33μM。
8.如权利要求1-3之一所述的SOF纳米基因载体在293A、Hela、H1299、Capan-1、PANC-1、HPDE、SiHA、Caco-2、U2OS细胞中进行基因转染的应用。
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