[发明专利]杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的甘胆酸单克隆抗体和检测试剂盒

说明书

本发明涉及检测技术领域，特别涉及杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的甘胆酸单克隆抗体和检测试剂盒。该杂交瘤细胞株的保藏编号为CGMCC No.15292。本发明具有的技术效果为：由本发明杂交瘤细胞株产生的甘胆酸单克隆抗体效价较高，可用于酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测甘胆酸，具有样品操作便捷、成本低廉、反应快速、灵敏度高、特异性强等特点。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，特别涉及杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的甘胆酸单克隆抗体和检测试剂盒。

背景技术

甘胆酸是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸之一，由肝细胞合成，同胆汁进入肠道，经门静脉再回肝脏，当肝细胞受损时，肝细胞摄取甘胆酸能力下降，致使血中含量增加。甘胆酸是肝脏分泌到胆汁中最大量的有机酸，进入肠腔帮助脂肪消化吸收，在回肠和结肠大部分被重吸收，经门静脉入肝脏，肝细胞能高效地从门静脉摄取大量的甘胆酸，以致血液中的甘胆酸量小于1.9g/mL。重吸收的甘胆酸又进入吸收循坏，通过这种机制，机体能充分利用这种甘胆酸。一旦肝细胞病变，血中的甘胆酸浓度增高，其中急性肝炎、慢性肝炎轻度升高，肝硬变，肝癌病人显著升高。当肝细胞受损时，肝细胞摄取血清甘胆酸(Cholyglycine，CG)能力下降，致使血中CG含量增高；胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍。而返流血液循坏的CG含量增高，也使CG含量升高。因此，甘胆酸是评价肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标之一。

另外孕妇在怀孕中后期，由于婴儿的增大，会压迫肝脏，使肝脏排泄胆酸发生障碍而导致甘胆酸偏高，另外由于妊娠期胎盘合成和分泌大量雌性激素和孕激素以及代谢负荷增大，可诱发肝胆系统的变化，使孕妇易患妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)，对胎儿产生严重的影响，随ICP患者血清CG增高使羊水污染率、早产率胎儿宫内窘迫率及破宫产率增高，严重者可导致胎儿死亡，因此测定孕妇血清甘胆酸，对及早发现ICP和了解ICP的严重程度有着非常重要的意义，甘胆酸的测定可作为筛查和随访ICP的指标，从而降低围产儿病死率。

目前，体外定量测定甘胆酸主要使用放射免疫分析法(RIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)等。放射免疫法需要有专业放免设施，普通实验室难以开展，且放免法准确度低，放射性射线还会对操作人员的健康产生极大的危害，国际上已很少使用。化学发光法灵敏度较高，但是测定速度较慢，测试结果的准确度和试剂稳定性较差，而且需要昂贵的专用化学发光检测设备，不利于常规实验室开展，临床应用局限性明显。酶联免疫吸附分析法(ELISA)具有样品操作便捷、成本低廉、反应快速、灵敏度高、特异性强等特点，能更好的运用甘胆酸的检测。但目前市售的甘胆酸单克隆抗体存在效价低的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了杂交瘤细胞株及基于杂交瘤细胞株的甘胆酸单克隆抗体和检测试剂盒。该甘胆酸单克隆抗体效价较高，特异性强，灵敏度高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种杂交瘤细胞株，保藏编号为CGMCC NO.15292。

本发明还提供了一种甘胆酸单克隆抗体，由本发明杂交瘤细胞株产生。

在本发明中，该甘胆酸单克隆抗体制备方法为：以甘胆酸为免疫原免疫小鼠，将免疫鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合，采用有限稀释法和间接ELISA筛选技术，获得阳性单克隆杂交瘤细胞株，诱生腹水，经纯化，得到甘胆酸单克隆抗体。

作为优选，骨髓瘤细胞为SP2/0骨髓瘤细胞。

作为优选，小鼠为Balb/C小鼠。

本发明还提供了该甘胆酸单克隆抗体在制备甘胆酸检测试剂盒中的应用。

本发明还提供了一种甘胆酸检测试剂盒，包括本发明提供的甘胆酸单克隆抗体。

作为优选，该甘胆酸检测试剂盒还包括包被抗原。