[发明专利]利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法

说明书

本发明属于生物技术领域，具体的说是一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法。向培养至对数生长期接近稳定期的三角褐指藻液中加入添加剂进行激素诱导，而后在23‑25℃、光强30‑35μmoL·m^‑2·s^‑1、光暗比12h/12h条件下培养6天，即实现油脂的积累；其中，添加剂为茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸中的一种或几种的组合，添加剂的添加量为每升藻液中13‑15mg茉莉酸甲酯、5‑7mg脱落酸和1‑3mg水杨酸。本发明方法简单易行、成本低、无污染、稳定高效。采用本发明方法调控后获得的藻体油脂含量高，增加迅速，可以作为工业化生物产油原料。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的说是一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法。

背景技术

全球化经济的快速发展，使得各国的能源消耗量急剧攀升。然而，地球上的化石能源储存是有限的，按照目前的消耗速度终有一天会被消耗殆尽。届时，人类社会的发展会受到严重限制。解决这一问题的关键在于寻找到新型可再生的清洁能源，这一压力已经迫在眉睫。生物柴油作为绿色可持续发展的新能源，受到越来越多的关注。我国传统的工业化生物柴油目前主要还是大豆、棕掘油等植物脂肪和某些动物脂肪或者废食用油作为原材料。原料虽然多样，但来源是非常有限的，因此寻找新一代的生物柴油原料已经迫在眉睫。而微藻因易于培养、具有单位面积产量大等优点，被视为新一代的、甚至是唯一能实现完全替代石化柴油的生物柴油原料。

微藻生物柴油生产的一大难题是传统油脂积累诱导方法复杂、困难、成本高昂。在众多诱导方式中，利用添加植物生长调节剂的手段进行人工诱导积累，较传统诱导调控方式具有简单、高效、直接、可控性高等特点。

三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)是硅藻门、羽文藻纲、褐指藻属的一种单细胞浮游藻种，脂质含量达细胞干重的20-30％，是微藻生物柴油开发的优良藻种。但是其脂质含量距离生产工艺开发尚有距离，选择一种诱导效率稳定高效的植物生长调节剂是当前一项重要的内容。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、速度快、成本低、稳定高效的一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种利用多种植物激素诱导三角褐指藻大量积累油脂的方法，向培养至对数生长期接近稳定期的三角褐指藻液中加入添加剂进行激素诱导，而后在23-25℃、光强30-35μmoL·m^-2·s^-1、光暗比12h/12h条件下培养6天，即实现油脂的积累；其中，添加剂为茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸中的一种或几种的组合，添加剂的添加量为每升藻液中13-15mg茉莉酸甲酯、5-7mg脱落酸和1-3mg水杨酸。

所述添加剂为每升藻液中14mg茉莉酸甲酯、6mg脱落酸和2mg水杨酸；获得油脂量为0.403119mg/10L。

所述培养至对数生长期接近稳定期的三角褐指藻液为将三角褐指藻在温度23-25℃、光强30-35μmoL·m^-2·s^-1、光暗比12h/12h的条件下，培养至对数生长期接近稳定期(OD₇₃₀为0.2-0.25)。

本发明与现有技术相比，其优点是：

1.本发明方法简单易行、成本低、无污染、稳定高效。

2.采用本发明方法调控后获得的藻体油脂含量高，增加迅速，可以作为工业化生物产油原料。

3.采用本发明方法，添加混合植物激素茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸能够诱导三角褐指藻大量积累甘油三酯，是单独添加植物激素诱导三角褐指藻积累甘油三酯含量的2倍。

附图说明