[发明专利]一种革兰氏阳性菌表面荚膜多糖结构衍生物的制备方法

权利要求书

1.合成革兰氏阳性菌细胞壁荚膜多糖结构衍生物的方法，其特征在于，所述革兰氏阳性菌细胞壁荚膜多糖结构衍生物包括下式所示的二糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖、九糖、十糖中的一种或多种：

其中，十糖结构如式I所示：

其中，R₆为氨基连接臂-(CH2)_n-N-Y₁Y₂，n＝1～10，用于和蛋白质相连接，其中n代表连接臂可以为不同的碳链长度，Y₁和Y₂为氨基的保护基，其中Y₁，Y₂为H或者为卞基(Bn)或者卞甲氧羰基(Cbz)；R₂，R₃，R₄，R₅基为氢(H)，或者乙酰基(Ac)，或者苯甲酰(Bz)，或者新戊酰基(Piv)，或者氯乙酰(ClAc)，或者乙酰丙酰基(Lev)，或者烯丙氧羰酰基(Alloc)，或者苄基(Bn)，或者2-萘甲基(Nap)，或者烯丙基(All)，或者苯亚甲基缩醛，或者异亚丙基缩酮；R₇，R₁₂基为氢(H)，或者乙酰基(Ac)，或者苯甲酰(Bz)，或者新戊酰基(Piv)，或者氯乙酰(ClAc)，或者乙酰丙酰基(Lev)，或者烯丙氧羰酰基(Alloc)，R₈基为H或者为卞基(Bn)，或者烯丙基(All)；R₁₃，R₁₄基为苄基(Bn)，或者2-萘甲基(Nap)，或者烯丙基(All)，或者苯亚甲基缩醛，或者异亚丙基缩酮；

二糖如式所示，其中，R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈参见式I；

三糖如式所示，其中，R₁₂、R₁₃、R₁₄、R₆、R₇、R₈参见式I；

四糖如式所示，其中，R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₁₂、R₁₃、R₁₄参见式I；

五糖如式所示，其中，R₆、R₇、R₈、R₁₂、R₁₃、R₁₄参见式I；

六糖如式所示，其中，R₂、R₃、R₄、R₅、R₁₂、R₁₃、R₁₄、R₆、R₇、R₈参见式I；

七糖如式所示，其中，R₁₂、R₁₃、R₁₄、R₆、R₇、R₈参见式I；R₉为2-萘甲基(Nap)；

八糖如式所示，其中，R₂、R₃、R₄、R₅、R₁₂、R₁₃、R₁₄、R₆、R₇、R₈参见式I；

九糖如式所示，其中，R₁₂、R₁₃、R₁₄、R₆、R₇、R₈参见式I；

合成线路为：

其中，R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₁₂、R₁₃、R₁₄参见式I；R₉为2-萘甲基(Nap)；R₁₀是糖基供体，为卤代糖、硫糖苷、三氯乙酰胺亚胺酯糖苷、磷酸酯糖苷、亚砜糖苷、N-苯基三氟乙酰亚胺酯糖苷；R₁、R₁₁是糖基供体，为卤代糖、硫糖苷、三氯乙酰胺亚胺酯糖苷、磷酸酯糖苷、亚砜糖苷、N-苯基三氟乙酰亚胺酯糖苷；

(1)以糖砌块1为糖基供体，以糖砌块2为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出1,4-α-连接的二糖片段3；

或者，在步骤(1)基础上，

(2)以糖砌块4为糖基供体，以糖砌块5为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再用路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出1,3-β-连接的二糖砌块6；

(3)以二糖砌块6为糖基供体，以糖砌块2为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于二氯甲烷中，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出三糖片段7；

或者，在步骤(3)基础上，

(4)选择性脱除三糖片段7的R₉，得到4号位为游离羟基的三糖砌块8，以糖砌块1为糖基供体，以三糖砌块8为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出四糖片段9；

或者，在步骤(4)基础上，

(5)以二糖砌块6为糖基供体，以三糖砌块8为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于二氯甲烷中，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出五糖片段10；

或者，在步骤(5)基础上，

(6)选择性脱除五糖片段10的R₉，得到4号位为游离羟基的五糖砌块11，以糖砌块1为糖基供体，以五糖砌块11为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出六糖片段12；

或者，在步骤(6)基础上，

(7)以二糖砌块6为糖基供体，以五糖砌块11为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于二氯甲烷中，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出七糖片段13；

或者，在步骤(7)基础上，

(8)选择性脱除七糖片段13的R₉，得到4号位为游离羟基的七糖砌块14，以糖砌块1为糖基供体，以七糖砌块14为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出八糖片段15；

或者，在步骤(8)基础上，

(9)以二糖砌块6为糖基供体，以七糖砌块14为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于二氯甲烷中，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出九糖片段16；

或者，在步骤(9)基础上，

(10)选择性脱除九糖片段16的R₉，得到4号位为游离羟基的九糖砌块17，以糖砌块1为糖基供体，以九糖砌块17为糖基受体，将糖基供体与糖基受体溶于干燥的二氯甲烷中，加入分子筛，然后再路易斯酸催化，在一定温度下搅拌，反应2-10小时，制备出目标十糖片段18；

构建β-D-鼠李糖糖苷键：首先合成6-脱氧-D-吡喃葡萄糖糖苷，把目标化合物的C-2号位用酰基类保护基进行保护，利用邻基参与效应，立体选择性生成β-D-吡喃葡萄糖糖苷，然后，选择性脱除葡萄糖C-2号位酰基类保护基，在C-2号位用磺酰基保护基经过SN₂机理的亲核取代，将C-2号位的平伏键转位生成直立键，即得到β-D-吡喃鼠李糖糖苷；或者利用氧化还原法，先把C-2号位氧化成酮，然后再用氢化铝锂或硼氢化钠还原剂还原得到C-2号位为直立键的化合物，即得到β-D-吡喃鼠李糖糖苷。