[发明专利]一种增强性磁靶向细胞荧光纳米探针及其制备方法

说明书

本发明提供了一种增强性磁靶向细胞荧光纳米探针的制备方法，其步骤为：(1)将四氧化三铁的乙醇溶液缓慢的加入乙醇水溶液中，于超声的条件下，缓慢加入氨水；于搅拌的条件下，滴加TEOS、8‑氯乙酰基氨基喹啉和物质A；所述物质A的化学结构式如式l；(2)将步骤(1)所得物利用无水乙醇清洗后，再利用无水甲苯清洗，之后加入无水甲苯和APTES，于105℃下进行回流反应8小时，之后利用磁场分离磁性粒子，利用乙醇进行清洗，即得，所得纳米荧光探针的粒径为200～250nm。本发明可以实现对于体内细胞的成像，由于所得探针具有磁响应性，还可以用于磁靶向性的对体内细胞成像。

技术领域

本发明属于生物医学纳米探针技术领域，具体涉及一种增强性磁靶向细胞荧光纳米探针及其制备方法。

背景技术

目前，在细胞的成像工作中，主要采用荧光染料进行，常用的染料具有容易猝灭、使用周期短的缺点，使得细胞的荧光成像工作有着较大的环境及应用时长的限制。

随着研究的不断深入，利用细胞内的钙离子、镁离子、铜离子和锌离子来进行相应的荧光检测，成为开展细胞成像工作的科研方向之一。

在制备锌离子探针方面，公开号为CN 101613344A的中国专利和公开号为CN102735662A的中国专利进行了有益的探索，获得了较好的效果。不过，虽然锌离子探针获得了广泛的研究，但是利用其进行深入的细胞成像的研究却很少。

磁靶向探针由于具有磁导向性，在癌症诊断及治疗方面具有广泛的应用。

因此，研发一种具有磁靶向功能、利用细胞内锌离子进行细胞成像的探针，是本领域所亟需的。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种增强性磁靶向细胞荧光纳米探针的制备方法该制备方法的步骤为：

(1)将四氧化三铁的乙醇溶液缓慢的加入乙醇水溶液中，于超声的条件下，缓慢加入氨水；于搅拌的条件下，加入8-氯乙酰基氨基喹啉和物质A，并滴加TEOS；

所述物质A的化学结构式如式l：

(2)将步骤(1)所得物利用无水乙醇清洗后，再利用无水甲苯清洗，之后加入无水甲苯和APTES，于105℃下进行回流反应8小时，之后利用磁场分离磁性粒子，利用乙醇进行清洗，即得。

在本发明中，发明人选用了与锌离子能够产生特异性识别反应的8-氯乙酰基氨基喹啉。不过发明人发现，当仅利用其制备磁性纳米探针时，所得该荧光很弱，几乎难以分辨，难以用于细胞成像。

通过反复试验，发明人加入如式l所示的化合物后，发现可以显著的增强对于在波长500nm处锌离子检测时的荧光强度，使得制备出来的探针可以直接用于细胞的荧光成像。

在此前的研究当中，授权公告号为CN 104198449 B的中国专利采用了如式Ⅱ所式的化合物作为探针，获得了很好的细胞成像效果。不过，发明人发现，其难以用于磁靶向性细胞荧光纳米探针的制备。当用其制备磁靶向性细胞荧光纳米探针，荧光强度会出现大幅的下降，无法完成细胞成像工作。造成该现象的原因正在通过设计不同的、类似的化合物来进行进一步的摸索确认。

在具体的工作中，发明采用PC3细胞(人体前列腺癌细胞)进行，并发现了上述的现象，所采用的细胞是与授权公告号为CN 104198449 B的中国专利是一致的。