[发明专利]一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球

权利要求书

1.一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其特征在于，其粒径为100～300μm，其外观有很细小的微孔结构，微孔的直径在0.02-1μm之间；含有大量的骨形成蛋白和磷脂的复合物，其骨形成蛋白的包封率大于70％，可从高分子复合微球内部及表面缓慢释放到外部环境。可用于医疗、药物、科研等领域。

2.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其高分子主要以乳酸共聚物类高分子为主，包含聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚己内酯、聚酯、及他们的共聚物等。

3.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其中骨形成蛋白是以可直接刺激细胞成骨诱导分化的蛋白质为主，包含BMP-2，BMP-7等，骨形成蛋白是与磷脂混合以磷脂-骨形成蛋白混合物(SL-BMP)的形式存在于分子复合微球内部及表面。

4.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其具体制备方法包含两个步骤：(1)磷脂-骨形成蛋白混合物的制备：将磷脂与骨形成蛋白按照不同的质量比例共同分散在含有5％(v/v)醋酸的二甲基亚砜，在30℃搅拌，后冻干处理。其中，30℃搅拌时长不高于12小时；(2)高分子微球的制备：将上述的冻干的磷脂-骨形成蛋白混合物与高分子材料按照不同的质量比例共同加入有机溶剂中常温溶解，形成有机溶液。再将其滴加到聚乙烯醇水溶液中，采用磁力搅拌子以低速搅拌，待有机溶剂挥发后得到固化的微球；将微球离心5min，再用超纯水重新悬浮，反复3次洗去多余的聚乙烯醇，再将微球冷冻干燥处理。其中，磷脂-骨形成蛋白混合物与高分子材料的质量比例是骨形成蛋白与高分子材料的质量比例为依据。

5.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其中磷脂与骨形成蛋白的质量比的范围分别为2:1～8:1；磷脂-骨形成蛋白混合物中的骨形成蛋白在二氯甲烷中的溶解度高于2mg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，其可高效负载骨形成蛋白(大于70％以上)，且可以缓慢释放骨形成蛋白，累计释放率在第1天释放20％-25％，在第10天释放30％-60％，在第30天释放40％-70％。

7.根据权利要求1所述的一种高捕获缓释高活性骨形成蛋白的高分子微球，所释放出的骨形成蛋白具有高活性，能明显促进细胞成骨分化，且成骨分化的标志性蛋白碱性磷酸酶(ALP)和成骨分化关键基因标记物(胶原类型1，基质Gla蛋白，Runt相关转录因子2，骨钙蛋白(OCN)，骨桥蛋白，骨保护素)都高于对照组的高分子微球。