[发明专利]基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法

说明书

本发明公开了一种基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法，包括以下步骤：1)按如下重量份称取：胎牛血清10～15份、丙二醇5～9份、DMEM3～8份、氯化钠8～12份、葡萄糖6～9份、氯化钾2～6份、甲硫氨酸6～11份、链霉素3～6份、碳酸钠7～12份、海藻酸钠2～6份、山梨醇1～5份、甘油3～8份、灭菌注射用水900～1500份；2)将步骤1)中的重量份依次置于匀速转动的容器中，转速60～80转/分，搅拌10分钟～15分钟使溶解，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为7.0，然后用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得细胞培养液。本发明配方方法简单，细胞存活率高，运输方便，使用方便，配置原材料简单易得，适合市场推广应用。

技术领域

本发明属于血清培养液技术领域，特别涉及一种基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法。

背景技术

细胞培养是人工模拟细胞在生物体内生长的营养环境，是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。当为粉剂时，倾向性的称为培养基，将粉剂配制成液体后，多称为培养液，培养液中常常补加血清、抗生素等成分。

目前市场上的培养基或培养液，均不同程度的还存在细胞成活率不够理想，增殖不够立项，成分复杂，培养液pH变化较大而影响细胞存活率，价格昂贵，不利于广泛应用的推广。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法，包括以下步骤：

1)按如下重量份称取：胎牛血清10～15份、丙二醇5～9份、DMEM3～8份、氯化钠8～12份、葡萄糖6～9份、氯化钾2～6份、甲硫氨酸6～11份、链霉素3～6份、碳酸钠7～12份、海藻酸钠2～6份、山梨醇1～5份、甘油3～8份、灭菌注射用水900～1500份；

2)将步骤1)中的重量份依次置于匀速转动的容器中，转速60～80转/分，搅拌10分钟～15分钟使溶解，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为7.0，然后用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得细胞培养液。

作为优选，所述链霉素为每份含链霉素10mg。

与现有技术相比，本发明所具有的有益效果是：本发明配方方法简单，细胞贴壁速度快，形态好，细胞增殖迅速，活力旺盛，细胞存活率高，运输方便，使用方便，配置原材料简单易得，适合市场推广应用。

具体实施方式

为使本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作详细说明。

一种基于胎牛血清的细胞培养液的培养方法，包括以下步骤：

1)按如下重量份称取：胎牛血清10～15份、丙二醇5～9份、DMEM3～8份、氯化钠8～12份、葡萄糖6～9份、氯化钾2～6份、甲硫氨酸6～11份、链霉素3～6份、碳酸钠7～12份、海藻酸钠2～6份、山梨醇1～5份、甘油3～8份、灭菌注射用水900～1500份；

2)将步骤1)中的重量份依次置于匀速转动的容器中，转速60～80转/分，搅拌10分钟～15分钟使溶解，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为7.0，然后用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得细胞培养液。

本实施例中，所述链霉素为每份含链霉素10mg。

以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。