[发明专利]一种用于促进刺五加苗期生长的方法有效
| 申请号： | 201810234222.8 | 申请日： | 2018-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN108513990B | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 王振月;刘悦;王谦博;王聪;沈宏伟 | 申请（专利权）人： | 黑龙江中医药大学 |
| 主分类号： | A01N63/04 | 分类号： | A01N63/04;A01P21/00;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京辰权知识产权代理有限公司 11619 | 代理人： | 郝雅娟 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 刺五加 内生真菌 苗期生长 生产成本低 分离纯化 实验筛选 实验研究 首次使用 有效促进 促生长 生物量 实生苗 叶片数 冠幅 活体 可用 种植 浇灌 育苗 繁殖 管理 | ||
1.一种促进刺五加苗期生长的方法，其特征在于：使用刺五加内生真菌与刺五加幼苗共生，所述刺五加内生真菌通过以下步骤分离纯化：
(1)清洗：冲洗采集到的新鲜刺五加根、茎、叶，除去表面的泥土和灰尘后，用去离子水洗2-4次；
(2)灭菌：用无菌滤纸吸干表面水分，进行表面消毒，无菌滤纸吸干残留水分；
(3)培养：用消毒后的医用剪刀或枝剪分别将根、茎、叶切成根、茎长1cm，叶1cm2的组织块，分别从各个部位中各随机挑取12个组织块，每4个组织块为一组放在加有青霉素的PDA培养基的培养皿中，培养4-8天；
(4)纯化：待长出菌丝后，进行真菌的纯化，得到刺五加内生真菌。
2.根据权利要求1所述的促进刺五加苗期生长的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)刺五加内生真菌的培养：
取刺五加内生真菌菌种，在无菌条件下，用接种针挑取少量菌丝，接种于已灭菌的PDA固体培养基，于28℃活化培养1-2周；
(2)刺五加内生链格孢真菌与刺五加幼苗的共生：
挑取内生真菌菌丝于液体培养基中，28℃摇床培养5-10天，有机土壤高温灭菌，放凉，将刺五加幼苗栽入其中，将摇床培养的菌液倒入苗盆中，每株苗每次加入10-30ml，每周加一次，共生30-60天。
3.根据权利要求2所述的促进刺五加苗期生长的方法，其特征在于：所述步骤(1)中活化培养1周。
4.根据权利要求2所述的促进刺五加苗期生长的方法，其特征在于：所述步骤(2)中28℃摇床培养6-8天，每株苗每次加入15-25mL，共生40-50天。
5.根据权利要求4所述的促进刺五加苗期生长的方法，其特征在于：所述所述步骤(2)中28℃摇床培养7天，每株苗每次加入20mL，共生45天。
6.刺五加内生真菌在制备促进刺五加苗期生长的药剂的用途，所述刺五加内生真菌通过权利要求1所述步骤分离纯化。
7.一种促进刺五加苗期生长的药剂，其特征在于：由刺五加内生真菌液体培养液及辅料组成，所述刺五加内生真菌通过权利要求1所述步骤分离纯化。
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