[发明专利]茭白种子胚直接成苗组织培养法及所用培养基

说明书

本发明公开了一种茭白种子胚直接成苗培养基的制备方法，取1LMS基本培养液先调pH值为5.7‑5.9，然后加入2.5‑4.2g植物凝胶和28‑32g蔗糖，高温灭菌；待灭菌后的溶液温度降至50‑60℃时，加入2.0mg的6‑BA母液、2.0mg的KT母液、0.2mg的NAA母液，得成苗培养基。本发明还公开一种茭白种子胚直接成苗组织培养方法：选取茭白种子进行消毒灭菌后获取其种子胚；将种子胚接种到成苗培养基上，于22‑27℃的温度下进行光照培养，光照强度为40‑60μmol/m²/s，每天的光照时间为16小时，直至长出2～3片的叶子，得绿苗，能够显著减少茭白从成熟种子到成苗的时间。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体涉及一种茭白种子胚直接成苗组织培养法及所用培养基。

背景技术

茭白(ZizaniacaducifloroHand-Mozz[Z.LatifliaTurcz])，又名茭瓜、茭笋，属禾本科，多年生水生宿根草本植物，植株高达2m左右，无主根，从茎节上抽生许多不定根。我国现在种植的茭白只长叶茎，不开花结籽，而开花结籽的就是菰米。因为菰米与“五谷”比起来，谷粒成熟期不一致，籽实容易脱落，收获困难，产量较低，还影响茭笋的生长，农民一经发现便立即拔除，所以我国现在只种植有黑粉菌寄生的茭白。

目前，茭白大多采用分株繁殖的方式，种子在自然条件下不萌发；而茭白进行分株繁殖时，其繁殖系数较低，速度较慢；在国内未见采取茭白种子繁殖种苗以扩大种植规模的报道。

为了缩短加代的世代周期，育种家们进行了不少的研究，总结出了一些具体可供利用的休眠破除技术，归纳起来大致有药剂法(双氧水和“920”浸种)和物理法(干湿交替、高低温交替、自然曝晒、刺破种皮等)，但各人方法不一，效果难以进行比较。

茭白的繁殖方式目前以无性繁殖为主，由于茭白孕茭是黑粉菌和茭白植株互作的结果，造成其种性很不稳定，而且受到季节的限制。因种子成熟后在自然条件下存在不发芽的缺陷，所以种子繁殖的有性繁殖方式还未见报道。目前茭白大多采用分株繁殖的方式，种子在自然条件下不萌发。现有技术中，茭白种植后35天左右到分蘖期，可以进行分株繁殖。因与黑粉菌互作孕茭，现有茭白分株繁殖易变异，所以茭白品性的稳定性差。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提出一种茭白种子胚直接成苗组织培养法及所用培养基。

为解决上述技术问题，本发明提出一种茭白种子胚直接成苗组织培养基的制备方法，包括MS基本培养液，以及包括以下步骤：

①、配置植物生长调节物质的母液：

先分别配置浓度均为0.1-0.3mg/ml的6-苄基腺嘌呤水溶液、萘乙酸水溶液、激动素水溶液；然后分别过滤灭菌，对应得6-苄基腺嘌呤母液、萘乙酸母液和激动素母液；

②、取1LMS基本培养液先调pH值为5.7-5.9(可利用1M KOH进行调节)，然后加入2.5-4.2g植物凝胶(Phytagel)和28-32g蔗糖，高温灭菌(为常规的高温灭菌处理，高温为100～150℃)；待灭菌后的溶液温度降至50-60℃时，加入2.0mg的6-苄基腺嘌呤母液、2.0mg的激动素母液、0.2mg的萘乙酸母液；得成苗培养基。

作为本发明茭白种子胚直接成苗组织培养基的制备方法的改进：

对作为植物生长调节物质的6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和激动素(KT)分别进行如下处理：

将植物生长调节物质用乙醇溶解后再加蒸馏水进行定容，从而分别制得浓度为0.1-0.3mg/ml的6-苄基腺嘌呤水溶液、浓度为0.1-0.3mg/ml的萘乙酸水溶液、及浓度为0.1-0.3mg/ml的激动素水溶液。

作为本发明茭白种子胚直接成苗组织培养基的制备方法的进一步改进：