[发明专利]一组用于检测眼内液中EB病毒的LAMP引物及应用在审

专利信息
申请号: 201810235386.2 申请日: 2018-03-21
公开(公告)号: CN110295166A 公开(公告)日: 2019-10-01
发明(设计)人: 陶勇 申请(专利权)人: 北京智德医学检验所有限公司
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/70
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 101300 北京市顺义区仁和*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 眼内液 应用 检测 单链DNA分子 检测EB病毒 高灵敏度 试剂盒
【说明书】:

发明公开了一组用于检测眼内液中EB病毒的LAMP引物及应用。本发明的LAMP引物,由序列1至6所示的6条单链DNA分子组成。本发明还保护LAMP引物的应用以及含有LAMP引物的试剂盒。实验证明,利用本发明的LAMP引物在检测EB病毒时具有高特异性和高灵敏度,应用本发明的LAMP引物组及方法,可快速、准确的检测出EB病毒。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中,一组用于检测眼内液中EB病毒的LAMP引物及应用。

背景技术

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV),又称人类疱疹病毒4型(Human herpesvirus4,HHV-4),它是一种γ亚科嗜淋巴细胞病毒属的DNA致病病毒,具有在体内外专一性的感染人类及某些灵长类B细胞的生物学特性。主要通过唾液传播,无症状感染多发生在幼儿,3~5岁幼儿90%以上曾感染EB病毒,90%以上的成人体内都有病毒抗体。随着抗生素和激素类药物的广泛应用,病毒性眼内炎症越来越常见于眼科临床,且上升为主要致盲眼疾之一。

目前临床针对病毒的检测方法主要是分离培养和血清学诊断。这些检测方法繁琐,检测时间长,灵敏度低,容易发生漏检和错检,无法满足快速检测的要求。近几年发展起来的分子检测技术,特别是PCR技术,在微生物快速鉴定和检测方面的应用,为病毒的快速检测开辟了新的途径。但是,PCR存在检测时间长、易污染、假阳性率高的缺点,使其应用受到限制。环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是近年来发展出的一种敏感、特异、简便、快捷的核酸扩增技术,其原理是在一种具有链置换活性的DNA聚合酶的作用下,识别6-8个区域的4-6条引物,在等温条件下快速、特异地扩增目的基因,可推广应用于快速、准确的检测病毒。

发明内容

本发明的目的是提供一组用于检测眼内液中EB病毒的LAMP引物组及应用。

本发明提供的LAMP引物组,由引物F3-1、引物B3-1、引物FIP-1、引物BIP-1、引物LF-1和引物LB-1组成;

所述引物F3-1为如下(a1)或(a2):

(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;

(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的单链DNA分子;

所述引物B3-1为如下(a3)或(a4):

(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子;

(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的单链DNA分子;

所述引物FIP-1为如下(a5)或(a6):

(a5)序列表的序列3所示的单链DNA分子;

(a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的单链DNA分子;

所述引物BIP-1为如下(a7)或(a8):

(a7)序列表的序列4所示的单链DNA分子;

(a8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的单链DNA分子;

所述引物LF-1为如下(a9)或(a10):

(a9)序列表的序列5所示的单链DNA分子;

(a10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的单链DNA分子;

所述引物LB-1为如下(a11)或(a12):

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