[发明专利]一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法，其特征在于包括如下制备骤：

步骤1)：将甲基泼尼松龙乙丙酸酯、四氢呋喃和N，N-二甲基甲酰胺混合，加入圆底烧瓶，升温至50-70℃，获得混合物A；

步骤2)：将0.6-0.8gβ-CD、0.6-0.8g琥珀酸酐和0.5-0.8mL三乙胺混合，加入到混合物A中，置于50℃下反应24-36h，获得混合物B；

步骤3)：将150-160mL丙酮缓慢加入到混合物B中，反应12h，经离心、洗涤、冷冻干燥，获得羧基化的环糊精；

步骤4)：取20-50mg步骤3)获得的环糊精溶于100-120mLN，N-二甲基甲酰胺中，室温下搅拌1h使其充分溶解，获得混合物C；

步骤5)：将0.3-0.5g碳二亚胺，0.9-1.6g 1-羟基苯并三氮唑混合，加入到混合物C中，再加入100-120mg胱胺二盐酸盐，室温避光磁力搅拌12h，获得混合物D；

步骤6)：将0.1-0.2mg 1，4-二巯基苏糖醇加入到混合物D中，获得第一反应产物羧基化环糊精-胱胺二盐酸盐；

步骤7)：将步骤6)获得的羧基化环糊精-胱胺二盐酸盐溶解于N,N-二甲基甲酰胺，在室温缓慢搅拌条件下，逐滴加入5.0-8.0mL氯乙酰氯与N，N-二甲基甲酰胺的混合溶液，置于80℃下继续反应12h，获得混合物E；

步骤8)：将50-80mL聚甲基丙烯酸N，N-二甲基氨基乙酯凝胶加入到混合物E中，反应、搅拌12h，将反应后产物先用大量丙酮充分洗涤，再用大量水洗涤，然后冷冻干燥得到第二反应产物聚甲基丙烯酸N，N-二甲基氨基乙酯-羧基化环糊精-胱胺二盐酸盐；

步骤9)：将20-40mg抗癌药盐酸阿霉素溶解于40-80mL磷酸盐缓冲溶液以使药物分散均匀，得到浓度为0.5-1.0mg/mL溶液，将其置于4℃冰箱中预冷；

步骤10)：称取50-60mg步骤8)获得的聚甲基丙烯酸N，N-二甲基氨基乙酯-羧基化环糊精-胱胺二盐酸盐溶于磷酸盐缓冲溶液，在磁力搅拌下，缓慢滴加50mL步骤9)中预冷后的溶液，继续搅拌下负载药物1-2h，获得混合物F；

步骤11)：将混合物F收集离心，洗涤三次后冷冻干燥，获得终产物负载抗癌药物的三重响应型智能纳米凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述甲基泼尼松龙乙丙酸酯、四氢呋喃和N，N-二甲基甲酰胺的体积比为0.5-1.5：1.5-2.5：6-8。