[发明专利]一种检测动物源性成分的试剂盒在审
申请号: | 201810242926.X | 申请日: | 2018-03-22 |
公开(公告)号: | CN108179201A | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 李文静;曾莲;彭丽;周均;黄莉 | 申请(专利权)人: | 四川华汉三创生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李佳 |
地址: | 610000 四川省成都市高*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试剂盒 动物源性 种检测 核酸 检测 检测技术领域 检测结果 鉴别动物 能力提供 特异性强 职能部门 执法部门 动物源 可视化 灵敏度 肉制品 引物 | ||
1.一种用于动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,其包括核酸组合,所述核酸组合包括:如下引物对中的一种或多种的组合:
包括SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物的用于检测猪源性成分的第一引物对;
包括SEQ ID NO.3所示的上游引物和SEQ ID NO.4所示的下游引物的用于检测羊源性成分的第二引物对;
包括SEQ ID NO.5所示的上游引物和SEQ ID NO.6所示的下游引物的用于检测驴源性成分的第三引物对;
包括SEQ ID NO.7所示的上游引物和SEQ ID NO.8所示的下游引物的用于检测鼠源性成分的第四引物对;
包括SEQ ID NO.9所示的上游引物和SEQ ID NO.10所示的下游引物的用于检测牦牛源性成分的第五引物对。
2.根据权利要求1所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括膜芯片,所述膜芯片上固定有碱基序列如SEQ ID NO.11-15所示的探针中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述膜芯片上还固定有阳性对照探针,所述阳性对照探针的碱基序列如SEQ ID NO.16所示。
4.根据权利要求3所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述核酸组合还包括:用于与阳性探针杂交结合的阳性寡核苷酸单链DNA分子,阳性寡核苷酸单链DNA分子的碱基序列如SEQ ID NO.18所示。
5.根据权利要求3所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述膜芯片上还固定有阴性对照探针,所述阴性对照探针的碱基序列如SEQ ID NO.17所示。
6.根据权利要求2所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述引物对中的上游引物的5’端或下游引物的5’端标记有生物素。
7.根据权利要求1-6任一项所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括如下组分中的一种或多种:
PCR缓冲液、去活化液、去活化清洗液、杂交清洗液、含链霉亲和素标记的催化酶的酶孵育液、孵育清洗液1、孵育清洗液2以及含所述催化酶的底物的显色液。
8.根据权利要求7所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述催化酶选自碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶和葡萄糖氧化酶;
当所述催化酶为所述辣根过氧化物酶时,所述底物是TMB、ABTS和OPD中的任意一种;
当所述催化酶为所述碱性磷酸酶时,所述底物是BCIP和NBT的组合物、对硝基苯磷酸盐、4-硝基苯磷酸二钠、萘酚AS-BI磷酸盐、萘酚-AS-MX-磷酸盐中的任一种;
当所述催化酶为葡萄糖氧化酶时,所述底物是葡萄糖。
9.根据权利要求7所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,
所述去活化液为:NaOH溶液;
优选的,所述去活化清洗液为:含0.8%-0.12%SDS的SSPE缓冲液;
优选的,所述杂交清洗液为:含0.4%-0.6%SDS的SSPE缓冲液;
优选的,所述孵育清洗液1为:含0.4%-0.6%SDS的SSPE缓冲液;
优选的,所述孵育清洗液2含有:NaCl、NaH2PO4和C10H14N2Na2O8·2H2O。
10.根据权利要求7所述的动物源性成分检测的试剂盒,其特征在于,所述去活化液为:90-110mmol/L的NaOH溶液;
优选的,所述孵育清洗液2含有:0.25-0.35mol/L NaCl、18-22mmol/L NaH2PO4和18-22mmol/L C10H14N2Na2O8·2H2O,pH为7.2-7.5。
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