[发明专利]用于宠物感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法及应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及用于宠物感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法及应用，所述蛋白芯片的制备方法包括如下步骤：(1)载玻片预处理；(2)抗体溶液点样；(3)封闭工艺制得所述蛋白芯片。本发明蛋白芯片用于犬和猫的感染标志物，应用本公司独创的蛋白芯片技术实现联合检测可以有效地提高检测效率，降低检测成本；本发明人开发了同时包含有犬CRP/SAA二联检、犬CRP/SAA/CPL三联检、猫CRP/SAA二联检、CRP/SAA/FPL三联检验的蛋白芯片诊断试剂盒，具有快速，高效，低成本等优点。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及用于宠物感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法及应用。

背景技术

宠物越来越多，注重宠物的健康，犬和猫CRP、SAA、CPL指标的重要性，市面上已有的各类试剂盒基于Elisa和胶体金，灵敏度低，线性范围窄，定性不定量，蛋白芯片基于化学发光，灵敏度高，线性范围宽，定量，联检通量高，成本底。

发明内容

本发明的目的是：提供一种用于犬和猫感染标志物检测的蛋白芯片，本发明的另一个目的是提供一种用于犬和猫感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种用于宠物感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)载玻片预处理；

(2)抗体溶液点样；

(3)封闭工艺，制得所述蛋白芯片。

优选的，所述步骤(1)中载玻片预处理的方法为：

①将载玻片置于含有2％的H₂SO₄的玻片预处理液中浸泡16～24h，之后采用纯化水清洗2～8次；

②将载玻片置于质量浓度为0.05～1％的硅烷水溶液中浸泡40～80min；

③将浸泡好的载玻片放入烘箱中，于150～210℃条件下烘烤0.5～1h。

优选的，所述步骤(2)中抗体溶液包括犬CRP、SAA、CPL单克隆抗体溶液和猫CRP、SAA、CPL单克隆抗体溶液。

优选的，所述步骤(2)中所述点样的方法为机器自动化点样，点样后载玻片上包括平行排列的若干列检测亚区和对照斑区。

优选的，所述步骤(3)中所述封闭过程为：将点样好的载玻片没入封闭液中2～8h，之后取出载玻片，并离心去除残余封闭液，制得所述蛋白芯片。

优选的，所述封闭液为含有1％的封闭蛋白的缓冲溶液；所述缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液、HEPS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或多种。

优选的，所述封闭蛋白为牛血清白蛋白或酪蛋白。

一种蛋白芯片的应用，其特征在于：将所述蛋白芯片制成试剂盒。

所述试剂盒还包括标记有HRP酶的第二抗体溶液、对HRP酶敏感的化学发光底物。

采用本发明的技术方案的有益效果是：

本发明蛋白芯片用于检测两个重要的犬和猫感染标志物，应用蛋白芯片技术实现联合检测可以有效地提高检测效率，降低检测成本；同时包含有CRP和SAA两个或CRP、SAA和CPL三个指标的蛋白芯片诊断试剂盒，具有快速，高效，低成本等优点。配合本公司的自动化蛋白芯片阅读仪，可以实现自动化检测。由于有效地将两至三个指标集成在一张芯片中进行检测，只需要一份犬或猫的血样就可以实现两至三个指标的同时快速检测。本产品和技术作为一种新颖的检测方法，目前世界上还没有同类产品面市。