[发明专利]一种PT试剂用于测定血浆内FXa活性的用途

说明书

本发明提供了一种PT试剂用于测定血浆内FXa活性的用途，以及采用PT试剂测定血浆内FXa活性的方法，所述PT试剂安全易得，代替昂贵稀少的RVV‑X，所述FXa活性测定方法简便易操作，高效灵敏，能有效反应血浆内FXa活性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，主要涉及一种PT试剂用于测定血浆内FXa活性的用途，具体涉及采用PT试剂测定人或动物血浆内FXa活性的方法。

背景技术

在凝血级联反应中，凝血因子10(FX)起着关键性作用，不管是内源性还是外源性凝血通路，最终都作用于FX，激活FX生成有活性的FXa。在FXa的催化作用下，凝血酶原生成凝血酶，发挥凝血作用。因此，FXa活性的变化，在凝血瀑布反应中起着关键性作用，通过对FXa活性的检测，可以在很大程度上反应血液凝血功能的情况。

此外，随着抗凝药物的发展，口服FXa抑制逐渐取代传统抗凝药物肝素、低分子量肝素和华法林，成为抗凝药市场上的主流药物。口服FXa抑制剂(如利伐沙班、阿哌沙班、依杜沙班等)，与传统抗凝药物相比，疗效更好，使用更方便，患者用药顺应性更高。尽管如此，口服FXa抑制同传统抗凝药物相类似，在使用剂量过大或特殊情况下，均会导致不同程度的出血副作用。如果出血部位是脑部或者重要脏器内，这种副作用可能是致命的。一般情况下，血浆凝血酶原时间(PT)和部分凝血酶原时间(APTT)可以反应患者体内的凝血功能情况。对于服用口服FXa抑制剂的患者，其血药浓度与PT或APTT的延长程度相关性较差，在服用推荐剂量口服FXa抑制剂的情况下，PT或APTT往往仅有部分延长或不发生延长。因此，通过测定患者血浆PT或APTT并不能很好地反映口服FXa抑制剂的在体活性。研究发现，血浆内FXa活性抑制率与口服FXa抑制剂的血药浓度呈正相关，通过FXa活性的检测能够比传统凝血指标PT和APTT更好地反映患者在体凝血功能。根据患者FXa活性，判断出患者是否抗凝过度或者抗凝不足，进而调整药物使用剂量，使得开发FXa抑制剂的使用更加安全有效。

CN101535498A公开了一种电化学法测定血液样品中Xa因子抑制剂的方法和设备，基于干燥化学的测试元件和测试元件分析系统，缩短测试周期，降低测试难度，但需要鲁塞尔蝰蛇毒，首先将血浆内FX转化成有活性的FXa，但RVV-X产量极低，保存不便，价格昂贵，且使用起来有一定的风险。

因此，提供一种使用简便、安全、准确，适用于各种情况下FXa活性的检测方法具有重要意义和广阔前景。

发明内容

针对现有技术的不足及实际的需求，本发明提供一种PT试剂用于测定血浆内FXa活性的用途，所述PT试剂安全易得，代替昂贵稀少的RVV-X，所述FXa活性测定方法简便易操作，高效灵敏，能有效反应血浆内FXa活性。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种PT试剂用于测定血浆内FXa活性的用途。

本发明中，用PT试剂代替常规检测FXa活性的RVV-X，现有技术中的RVV-X可以不依赖外源性和内源性凝血通路，在钙离子存在下，直接将FX催化为FXa，进而发生凝血反应，而本申请中的采用PT试剂检测FXa活性的检测原理与其完全不同，血液从体内取出后，使用抗凝剂枸橼酸钠与钙离子即凝血因子IV结合，使得血浆内缺乏了凝血因子III和IV，加入PT试剂后可激活凝血瀑布反应，在凝血因子VII的共同作用下，形成凝血因子III、IV和VII的复合物，在钙离子的存在下，凝血因子X生成有活性的FXa，FXa与凝血因子IV、Va形成复合物，催化凝血因子II生成FIIa，即凝血酶，如无凝血酶抑制剂的存在下，凝血酶将催化凝血因子I(纤维蛋白原)生成纤维蛋白，纤维蛋白相互结合使得血浆凝固，因此，在反应体系中均须加入一定量的凝血酶抑制剂。

优选地，所述PT试剂包括兔脑提取物、葡萄糖、白蛋白、山梨酸钾和氯化钙。