[发明专利]一种控制青枯菌群体数量的组合菌剂及其制备方法、应用

说明书

本发明公开了一种控制青枯菌群体数量的组合菌剂及其制备方法、应用，组合菌剂由对青枯菌具有侵染裂解能力的噬菌体溶液与对青枯菌具有拮抗能力的芽孢杆菌溶液混合配制而成，其制备方法为：(1)采用共培养的方法培养获得对青枯菌具有侵染裂解能力的噬菌体株系，经滤膜过滤后得噬菌体溶液；(2)采用NB液体培养基培养获得对青枯菌具有拮抗能力的芽孢杆菌株系，振荡培养后离心获取芽孢杆菌溶液；(3)将噬菌体溶液与芽孢杆菌溶液按所述比例配制而成，即得组合菌剂；在烟草生长过程中，将组合菌剂施用于有青枯菌的烟田土壤中；与现有技术相比，本发明能较好的控制烟草青枯菌的群体数量，从而减少烟草青枯病的发生。

技术领域

本发明涉及生物防控技术领域，尤其涉及一种采用侵染裂解烟草青枯菌的噬菌体及拮抗烟草青枯菌的拮抗菌的组合菌剂的制备，及其在控制烟草青枯菌群体数量方面的应用。

背景技术

青枯病是由Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)侵染引起的系统性病害，它是一种典型的维管束病害，最显著的症状是枯萎，发病严重时会造成整株死亡，导致绝收，给烟叶生产造成重大经济损失。目前，烟草青枯病在我国主要产烟省区均有发生，引起我国烟草青枯病的青枯菌主要为演化型I，1号生理小种。烟草青枯病的发生是烟草、病原菌、环境共同作用的结果，环境温度、湿度、土壤pH及土壤中青枯菌的群体数量等都与烟草青枯病的发生有密切的关系。

传统控制青枯菌群体数量的方法主要有：及时清理烟田中的烟杆烟叶残留物及其它青枯病的宿主植物、使用化学制剂控制青枯菌数量、通过使用生物有机肥添加青枯菌的拮抗菌、土壤消毒、合理的耕作和栽培措施等方法控制烟田中青枯菌的群体数量。

随着抗生素的广泛使用，以及耐药性或抗药性的出现，绿色防控和生物防控作为传统药物疗法的替代重新受到关注。近年来利用噬菌体防治植物细菌性病害，利用青枯菌的拮抗微生物进行生物防控引起关注和探讨。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种控制青枯菌群体数量的组合菌剂及其制备方法、应用，用对烟草青枯菌具有侵染裂解特性的噬菌体和对烟草青枯菌具有强拮抗能力的芽孢杆菌组合菌剂，协同控制烟草青枯菌的群体数量，从而减少烟草青枯菌侵染烟株，降低烟草青枯病的发生，以克服现有技术的不足。

本发明的技术方案是：一种控制青枯菌群体数量的组合菌剂，所述组合菌剂由对青枯菌具有侵染裂解能力的噬菌体溶液与对青枯菌具有拮抗能力的芽孢杆菌溶液混合配制而成。

所述噬菌体溶液的浓度为1×10⁷-1×10⁹PFU/ml，所述芽孢杆菌溶液的浓度为1×10¹⁰-1×10¹²CFU/ml，噬菌体溶液与芽孢杆菌溶液按体积配比为1：10-15的比例配制而成。

本发明还提供一种控制青枯菌群体数量的组合菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)采用共培养的方法培养获得对青枯菌具有侵染裂解能力的噬菌体株系，经滤膜过滤后得噬菌体溶液；

(2)采用NB液体培养基培养获得对青枯菌具有拮抗能力的芽孢杆菌株系，振荡培养后离心获取芽孢杆菌溶液；

(3)将噬菌体溶液与芽孢杆菌溶液按所述比例配制而成，即得组合菌剂。

本发明还提供上述控制青枯菌群体数量的组合菌剂的应用，在烟草生长过程中，将所述组合菌剂施用于有青枯菌的烟田土壤中。

本发明的有益效果是：本发明采用对青枯菌具有侵染裂解作用的噬菌体与对青枯菌具有拮抗效果的芽孢杆菌组合共同控制烟草青枯菌的群体数量，从而减少烟草青枯病的发生。与现有技术相比，本发明具有以下优势：

1.安全环保，环境友好，对烟草青枯菌具有侵染裂解特性的噬菌体和对烟草青枯菌具有拮抗特性的芽孢杆菌都是来源于烟田土壤中。