[发明专利]一种水产养殖用二元复合菌剂

说明书

本发明涉及一种粪产碱菌与解淀粉芽孢杆菌的二元复合菌剂，及其在水产养殖中的应用，具体还涉及一种含有粪产碱菌、解淀粉芽孢杆菌的二元复合菌剂，及含有粪产碱菌、解淀粉芽孢杆菌和芦苇的大黄鱼养殖用饲料。可控制溶藻弧菌、副溶血弧菌和杀香鱼假单胞菌大黄鱼病原细菌，提高大黄鱼抗病力，减少大黄鱼发病。

技术领域

本发明涉及一种粪产碱菌与解淀粉芽孢杆菌的二元复合菌剂，及其在水产养殖中的应用，具体还涉及一种含有粪产碱菌、解淀粉芽孢杆菌、和芦苇的大黄鱼养殖用饲料。

背景技术

大黄鱼(Larimichtys crocea)是我国重要的海水名贵鱼类，近年来大黄鱼人工养殖技术取得重要进步，我国年产大黄鱼12.79万吨，是我国养殖产量最高的海水鱼类。大黄鱼养殖规模的扩大造成大黄鱼病害频繁发生。我国大黄鱼先后暴发了弧菌、杀香鱼假单胞菌、刺激隐核虫、虹彩病毒等疾病，其中细菌性疾病不但可以作为原发性病原感染大黄鱼，也可在寄生虫和病毒感染后继发入侵，是其他病原感染后期主要的死亡原因，细菌病原成为阻碍大黄鱼产量提高、产业稳定发展的重要障碍。从大黄鱼水产病害测报数据来看，由细菌引起的大黄鱼发病和损失占全部病害损失的40％以上。近年来对抗生素的使用管理日益规范，迫切需要寻找安全、高效的有益菌株，用于细菌性鱼病的控制。

内生菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物组织和器官的细胞间隙或细胞内的细菌，最早的内生菌主要指内生真菌，与植物的驱虫作用有关。随着研究的深入，内生细菌也日益受到重视。目前植物内生细菌具有产生抗真菌、抗细菌和寄生虫、固氮作用等多种功能，是微生物农药、增产菌或潜在的生防载体菌。芦苇(Phragmitesaustralis)是多年水生或湿生的高大禾草，可生长于沟渠、河堤沼泽地、盐度较高的滨海湿地和沿海滩涂，芦苇抗逆性强、适应性好、繁殖快，在污水净化中有重要的生态作用，是重要的生态恢复植物。芦苇含有丰富的内生菌，除镰孢属、青霉属和链格孢属为优势菌属外，还有20门以上近千种不同类型的内生细菌。

为寻找高效安全的海水鱼病害防控有益微生物制剂，为海水鱼病的防治提供更多选择，本发明对象山大黄鱼养殖海域的芦苇进行了采集和内生菌分离，并采用大黄鱼主要病原菌杀香鱼假单胞菌和溶藻弧菌为指示菌进行了拮抗菌株筛选，鉴定了有抑菌活性菌株，开展了分离菌株的抑菌谱、分离菌株对小鼠和大黄鱼毒性以及对抑制大黄鱼肠道弧菌等方面的作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题

在水产养殖领域中，亟需有效防治那些降低商品鱼类生产产率的病原体的方法。在鱼类发生疾病的情况下，主要具有预防特性的且能够避免和减轻诱病因素的早期干预可发挥较大作用。为此，寻找可行的替代处理方法非常重要。可用方法应该能够防治广谱病原菌并满足目前的安全准则。本发明满足这些标准并具有其他优点。

本发明溶藻弧菌及杀香鱼假单胞菌为指示菌，对大黄鱼养殖区域附近分离的菌株进行筛选，共获得10株活性菌有较强抑菌活性的菌株，16S rDNA鉴定为芽孢杆菌(Bacillussp.)、碱性杆菌(Alcaligenes sp.)、类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)、弧菌(Vibrio sp.)、异常球菌 (Daenococcus)。通过16SrDNA与gyrB基因同源性比对及系统发育分析，结合形态和生化鉴定，将抑菌活性较强的NBPa-7和NBLm-36鉴定为粪产碱菌 (Alcaligenes faecalis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)。