[发明专利]一株产阿魏酸酯酶谢瓦散囊菌及其在白酒大曲中的应用

说明书

本发明涉及一株产阿魏酸酯酶的谢瓦散囊菌及其在白酒大曲生产中的应用，属于生物技术领域。本发明的谢瓦散囊菌（Eurotium chevalieri）分离自白酒大曲中，具有产阿魏酸酯酶特征，菌株原始编号为M6，菌种保藏编号为CGMCC No.14125。本发明的优点在于：提供了一株产阿魏酸酯酶的谢瓦散囊菌，并将其制备成谢瓦散囊菌菌粉，将该菌粉按一定比例应用于白酒大曲生产中，可制得高阿魏酸酯酶活性的优质大曲，该大曲曲心具明显的谢瓦散囊菌金黄色菌斑，由该大曲发酵的酒液较对照曲具有酒度高、己酸和己酸乙酯含量高等特征。

技术领域

本发明涉及一株产阿魏酸酯酶谢瓦散囊菌及其在白酒大曲中的应用，属于生物技术领域。

背景技术

白酒大曲为传统酿造用曲中的一种，又称块曲或砖曲，是白酒发酵生产中至关重要的元素，以小麦、大麦、豌豆等为原料，经过粉碎，加水混捏，压成曲醅，形似砖块。根据生产温度的不同，大曲可分为低温曲、中温曲、中偏高温曲和高温曲；在成曲的过程中，微生物大量生长，将原料中的大分子物质(淀粉、脂类、蛋白质等)降解为可吸收的小分子物质，为后期的发酵生产提供丰富的底物、微生物、生物酶。

阿魏酸酯酶(feruloyl esterase，FAE)又名肉桂酸酯酶，属羧酸酯水解酶的亚类之一，指能水解阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸酯中的酯键，将阿魏酸游离出来的一种酶。其能够水解植物细胞壁中多糖-多糖、多糖-木质素间之间通过阿魏酸或双阿魏酸形成的酯键，导致植物细胞壁复杂网络结构的破坏，使得其他水解酶更容易接近底物的作用中心，从而提高了植物细胞壁的降解效率。阿魏酸酯酶在饲料、食品、造纸、纺织、生物能源、化妆和医药工业等领域具有广泛的应用前景，其应用于白酒大曲生产中，可以使大曲中原料细胞壁的降解效率提高，从而使大曲中的微生物转化反应更彻底。

散囊菌属真菌大量存在于传统发酵食品生产过程中，具有产多酚氧化酶、果胶酶、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶以及抑制杂菌生长等作用，作为有效的生化动力，可催化发酵食品中各种相关物质发生氧化、聚合、降解、转化，改善发酵食品的品质。如冠突散囊菌(Eurotium cristatum)、谢瓦散囊菌(Eurotium chevalieri)、蜡叶散囊菌(Eurotiumherbariorum)等大量存在于黑茶发酵工艺中，具有改善茶叶品质和一定的保健功能，特别是茯砖茶中的金花菌(冠突散囊菌)的含量已作为茯砖茶品质标志的金标准。

谢瓦散囊菌(Eurotium chevalieri)属于真菌界、子囊菌门、散囊菌纲、散囊菌目、发菌科、散囊菌属。该菌种无性型名称为谢瓦曲霉(Aspergillus chevalieri)，为嗜高渗透压菌种，在一般的培养基上生长不良或不能生长，在低水活度培养基上可以正常生长。谢瓦散囊菌主要以闭囊壳方式产生有性孢子，菌种在生长过程中形成大量球形闭囊壳，每个闭囊壳中包含上千个子囊，每个子囊中含有八个子囊孢子，在菌剂制备过程中选取一定的破壁方法，可以极大提高菌剂的孢子浓度。

谢瓦散囊菌主要与茶叶、烟草、白酒、豆酱等发酵生产相关，已有大量文献报道谢瓦散囊菌存在于白酒发酵生产过程中(酱香型、浓香型、清香型大曲中均分离到)，如黄小宁等(2016年)通过PCR-DGGE研究显示谢瓦散囊菌存在于浓香型大曲和酱香型大曲中，且为浓香型大曲中的优势真菌；胡佳音等(2016)通过传统可培养方法结合高通量测序分析方法显示谢瓦散囊菌为浓香型大曲和酱香型大曲中的主体真菌；周森等(2016)通过高通量测序分析显示其存在于清香型大曲中；张晓娟等(2015)通过可培养分离方法研究显示其存在于浓香型大曲中；班世栋等(2014)研究显示其存在于酱香型大曲中；孙剑秋等(2013)通过平板培养方法研究显示其存在于酱香型白酒酒醅中，分离率达16％。目前对谢瓦散囊菌的研究主要处于分离鉴定的水平，其在白酒生产中的应用方式和具体功能值得进一步研究。