[发明专利]一种青霉菌及通过其微生物代谢制备D-甘露醇的方法和应用

权利要求书

1.一种青霉菌(Penicillium sp.)T2-8-10，由天麻茎部内生青霉菌经人工诱变后分离纯化所得的诱变菌株，该诱变菌株经16S rRNA分析鉴定为Penicillium sp.；菌株产大量灰色孢子，存活率较高，易于培养和保藏，其保藏编号为CGMCC No.14625。

2.一种通过微生物代谢制备D-甘露醇的方法，其特征在于，液体有氧发酵青霉菌T2-8-10可大量制备D-甘露醇，

代谢产物D-甘露醇的结构是：

所述青霉菌T2-8-10的保藏编号为CGMCC No.14625。

3.根据权利要求2中的通过微生物代谢制备D-甘露醇的方法，其特征在于培养条件简便、绿色无污染，以体积质量百分比计所述发酵培养基成分：0～2.8％葡萄糖，0.2％磷酸氢二钾，0.1～0.2％七水合硫酸镁，20％马铃薯汁1L，2毫克每升硫胺素；

菌体活化：将青霉菌T2-8-10接种到经过121℃高温灭菌30min的PDA斜面培养基，置于28℃恒温培养箱中培养2～7d后，置于4℃冰箱中备用；

菌种制备：将活化的菌体接入PDB培养基中，25～28℃，150～200rpm下进行发酵3d；

发酵过程：将制备好的菌种按照体积分数5～10％加入发酵培养基25～28℃，150～200rpm下进行发酵7～9d；

发酵结束后，发酵液连同菌体超声破壁15～30min，再用等体积的乙酸乙酯萃取两次，真空浓缩得到粗提物，分离粗提物得到D-甘露醇；

经薄层层析和高效液相色谱检测粗提物，D-甘露醇为主要代谢产物，含量达粗提物的12.75～14.38％；

然后经过凝胶柱层析分离(甲醇洗脱)，通过NMR以及HR-ESI-MS鉴定确定化合物结构；代谢产物D-甘露醇的结构式是：

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，菌体活化的培养基为PDA培养基。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，菌种制备的培养基为改良PDB培养基。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，菌株最优发酵的时间为7～9d。

7.一种青霉菌T2-8-10用于制备D-甘露醇。