[发明专利]一株邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用

说明书

一株邻苯二甲酸二(2‑乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用，涉及一株邻苯二甲酸二(2‑乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用。本发明提供一株邻苯二甲酸二(2‑乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用，为有效解决DEHP的污染问题提供工具。该菌株为Arthrobacter sp.DNEH‑S1，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2017年6月8日，保藏编号为CCTCC No：M 2017315。本发明的邻苯二甲酸二(2‑乙基)己酯降解菌能够降解土壤中的DEHP，可以有效降低DEHP对土壤微生物活性的毒害作用。

技术领域

本发明涉及一株邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用。

背景技术

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)是一种高分子量的邻苯二甲酸酯类化合物(Phthalic acid esters,PAEs)，同时其作为一种增塑剂已被广泛应用于聚氯乙烯的制造中。由于DEHP具有生物毒性，且对人体具有“三致”毒性，已被美国国家环保局和中国环境监测总站列为优先控制污染物，DEHP污染环境的修复也因而成为国内外研究的热点之一，其中微生物修复具有经济、安全、高效等优势而具有较大的应用潜力。

DEHP是产量最大、使用最广的增塑剂品种。随着中国塑料制造业的产量不断提高，废水、河流、湖泊底泥与土壤中均能够检测到DEHP的存在；由于DEHP为亲酯高疏水性污染物，因此很容易在环境中累积并对环境造成污染。

DEHP生物毒性高，具致畸性、致突变性、致癌性及生殖毒性，加上其不易被生物分解，因此对于如何降低DEHP对生态环境及环境中生物所造成的危害以及深入探讨土壤典型有机污染物的微生物修复机制，已经成为全世界相关领域学者和专家研究的热点。

发明内容

本发明提供一株邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯降解菌及其培养方法和应用，为有效解决DEHP的污染问题提供工具。

本发明邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯降解菌为Arthrobacter sp.DNEH-S1，保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2017年6月8日，保藏编号为CCTCC No：M 2017315。

本发明Arthrobacter sp.DNEH-S1为革兰氏阳性菌，杆状，呈链状排列，菌体大小约为2.1μm×0.6μm。菌落为乳白色、有光泽，表面湿润且中间隆起，边缘整齐。

本发明Arthrobacter sp.DNEH-S1的脲酶试验、糖酵解试验、甲基红试验、柠檬酸盐利用试验、吲哚试验均为阳性，淀粉水解试验、V-P试验、油脂水解试验、明胶液化试验、石蕊牛乳试验为阴性，能利用DEHP为唯一碳源和能源进行生长繁殖。

本发明Arthrobacter sp.DNEH-S1的培养方法简单，生长迅速，很难发生变异，其菌液可以直接作用于被DEHP污染的土壤。

本发明Arthrobacter sp.DNEH-S1可在无机盐培养基中培养，其中无机盐培养基成分是：K₂HPO₄·3H₂O：1g；MgSo₄·7H₂O：0.4g；NaCl：1g；NH₄NO₃：0.5g；FeCl₃·6H₂O：0.01g；CaCl₂·2H₂O：0.075g；蒸馏水：1L。Arthrobacter sp.DNEH-S1的最适生长温度为30～35℃，最适pH值为7～9。

本发明Arthrobacter sp.DNEH-S1的培养方法如下: