[发明专利]NF-L在神经梅毒脑脊液检测中的应用

说明书

本发明涉及NF‑L在神经梅毒脑脊液检测中的应用。具体地说，本发明提供了一种神经梅毒检测试剂盒，所述试剂盒包括用于检测脑脊液NF‑L水平的检测试剂。本发明还提供了用于检测脑脊液NF‑L的第一检测试剂在制备神经梅毒检测试剂盒中的应用。本发明可以用于神经梅毒的早期诊断、分型分期、疗效评价和/或预后评估，具有高可靠性、高灵敏度等优点。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及NF-L在神经梅毒脑脊液检测中的应用。

背景技术

中间纤维(intermediate filaments，IFs)是组成神经细胞轴索复合网络系统的3种骨架蛋白之一，中间纤维对细胞核有固定作用、给细胞提供机械强度、参与细胞连接、对细胞内物质运输起作用、参与细胞分裂活动、参与信息传递活动等。中间纤维是一种空心纤维结构，直径为10nm，主要分为神经丝蛋白等六类。神经丝蛋白(Neurofilament，NF)只表达于神经细胞，包括神经丝蛋白轻链(Neurofilament-Light，NF-L)、神经丝蛋白中链(Neurofilament-Medium，NF-M)、神经丝蛋白重链(Neurofilament-Heavy，NF-H)三种亚结构；其结构与其他中间纤维类似，包括头部氨基区、α螺旋的杆状区以及尾部羧基区。神经丝蛋白的作用是稳定轴索的形态，保持其直径及维持其稳定的传导速度，并在神经元分化，轴突生长和再生过程等过程中发挥作用。

NF-L是神经丝蛋白中最先被表达的亚结构，分子量为68kDa。NF-H也是组成神经丝蛋白的主要成分之一，分子量为205kDa，是最后表达的神经丝蛋白，与扩增轴索直径以及提高轴索传导速度直接相关。据报道，NF-L与NF-H的表达水平是相互独立的，这可能与它们的基因组定位不同有关。

NF-H的羧基端有51个磷酸化的位点，从近端到远端，磷酸化程度不同。在神经元胞体或者树突中，NF-H基本无磷酸化存在，而在神经元轴索中，则多以磷酸化的形式即磷酸化神经微丝蛋白重链(phosphorylated Neurofilament-Heavy，pNF-H)存在，NF-H对于稳定轴索形态以及神经信号的传导起到重要作用。

梅毒是由梅毒螺旋体侵入人体后引起的一种全身性、感染性疾病。梅毒螺旋体是一种小而纤细的螺旋状微生物，横断分裂的方式进行繁殖，其结构中有维持螺旋体弹性的轴纤维，可以屈曲及伸缩，有利于梅毒螺旋体穿入宿主组织。梅毒螺旋体在人体外不易生存，煮沸立即死亡，干燥肥皂水以及酒精等一般的消毒剂可以很容易将其杀死，因此目前不能体外培养，梅毒螺旋体在低温(-78℃)下可保存数年，仍能保持其形态活力及毒性。梅毒螺旋体在不能体外培养可以在一定程度上限制了梅毒螺旋体的传播和侵入，但是也使得对梅毒螺旋体的研究以及对梅毒疾病的研究造成了极大的困难和不变，因此目前梅毒的诊断、治疗以及预后研究进展不大。

神经梅毒是梅毒螺旋体侵犯中枢神经系统而引起的慢性感染性疾病，可以造成难以恢复的神经系统损害，是梅毒致残的主要原因，因此神经梅毒已经成为严重威胁人类健康的疾病。

神经梅毒可以发生于梅毒的各个阶段。神经梅毒可分为无症状神经梅毒(Asymptomatic Neurosyphilis)、脑脊膜梅毒(Meningeal Syphilis，包括梅毒性脑膜炎和梅毒性硬脊膜炎)、脑膜血管梅毒(Meningovascular Syphilis)、实质性神经梅毒(麻痹性痴呆(general Paresis)和脊髓痨(Tabes Dorsalis))及树胶肿性神经梅毒(参见图1)。

无症状神经梅毒是指梅毒的血浆学检查阳性，脑脊液存在异常，但是无神经系统的症状和体征，通常发生在感染后的12至18个月，是神经梅毒的最初阶段，无症状神经梅毒患者比脑脊液正常的梅毒患者更容易进展为有症状神经梅毒，因此应对可疑患者进行脑脊液检查，以期早发现早治疗，避免无症状神经梅毒进展为有症状神经梅毒。

脑脊膜梅毒包括梅毒性脑膜炎和梅毒性硬脊膜炎，主要发生于梅毒感染后的12个月内，可发生于1.4％至6％的梅毒患者中，主要原因是早期梅毒阶段未能得到充分治疗。