[发明专利]一种检测鱼类胆汁中个人护理品的方法

说明书

本发明涉及一种检测鱼类胆汁中个人护理品的方法，主要包括以下步骤：样品添加内标和水解、样品提取和净化、分析检测。本发明基于多同位素内标分析方法，采用最佳蛋白和磷脂去除管和d‑SPE管对胆汁样品进行提取净化，通过UPLC‑MS/MS仪器和GC‑MS仪器测定净化试样中的个人护理品(PCPs)的浓度，避免了样品保存时间短、检出限较高、复杂基质干扰严重等问题，建立了一套简便快捷且准确度和灵敏度较高的检测方法。另外，该方法通过在提取净化前的胆汁样品中加入或不加入水解酶，实现了胆汁中PCPs的总浓度和自由态浓度的对比测定，有助于揭示PCPs在鱼类胆汁中的存在形态。

技术领域

本发明涉及个人护理品检测方法领域，特别是涉及一种检测鱼类胆汁中个人护理品的方法。

背景技术

个人护理品(Personal Care Products，PCPs)是人们日常生活中不可或缺的日用化学品，其中包含很多活性成分，例如用于抗真菌、消毒、防污、防腐等的杀生剂类，用作化妆品固着剂和定香剂等的合成麝香类，用作化妆品紫外吸收剂的苯并三唑类。这类日用化学品使用后，其中的PCPs类活性成分通过污水处理厂直接或间接排入水环境。而污水处理厂对PCPs的去除效率有限，因此，PCPs在国内外河流环境中频繁检出，个别化合物甚至高达μg/L数量级。河流环境中较高浓度的PCPs对于栖息于其中的水生生物会产生一系列生态毒理效应，例如会在各种鱼类体内产生生物富集作用。

对鱼类而言，肝脏代谢作用后经胆囊排泄胆汁是一种去除环境外源性污染物的重要途径。因此，鱼胆汁中外源性污染物的含量能够作为生物体吸收外源性污染物后内暴露的重要指标，尤其是亲水性污染物，这类污染物易于以胆汁形式排泄。因此，有必要建立一种检测鱼类胆汁中PCPs的方法，用于检测野外鱼体胆汁中PCPs的含量，从而指示环境中生活污水的污染。

目前，针对PCPs的环境监测，已有相关研究采用超声提取、固相萃取(SolidPhaseExtraction，SPE)和高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法分析测定水体和土壤样品中的PCPs，以及基于QuEChERS(快速Quick、简单Easy、廉价Cheap、高效Effective、耐用Rugged、安全Safe)方法结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)和气相色谱串联质谱(GC-MS)测定鱼肉样品中的PCPs。但目前为止，还没有野外鱼胆汁中PCPs检测方法的报道。因此，亟需建立一种鱼类胆汁样品中PCPs浓度的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种检测鱼类胆汁中个人护理品的方法。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种检测鱼类胆汁中个人护理品的方法，包括以下步骤：(1)样品添加内标和水解，(2)样品提取和净化，(3)分析检测；所述的胆汁是单一鱼类胆汁；

所述步骤(1)中，实验组1：在胆汁样品中加入水解酶β-glucuronidase和aryl-sulfatase；实验组2：在胆汁样品中不加入水解酶β-glucuronidase和/或aryl-sulfatase；

所述步骤(2)中，先用蛋白和磷脂去除管和乙腈对样品进行混合沉淀，再采用d-SPE管进行分散型固相萃取，所述d-SPE管内含900mg无水硫酸镁、150mg乙二胺基-N-丙基填料和150mg C18；在所述蛋白和磷脂去除管和d-SPE管中，加入的有机试剂为含1％v/v乙酸的乙腈；

所述步骤(3)中，将步骤(2)的净化产品分为两份：一份采用UPLC-MS/MS仪器检测；一份采用GC-MS仪器检测；

用所述UPLC-MS/MS仪器的ESI+模式测定的个人护理品，包括避蚊胺、艾卡瑞丁、多菌灵、噻苯咪唑、氟康唑、酮康唑、甘宝素、克霉唑、咪康唑、伊曲康唑、苯并三唑、5-甲基苯并三唑、5-氯苯并三唑、5,6-双甲基苯并三唑；